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Helenna电泳仪操作程序
1.准备
1.2试剂的准备:脱染色液:取500ml冰醋酸于脱染色液桶中再加入9500ml蒸馏水混匀。有效期6个月。
1.2染色液:取浓缩酸兰染剂一瓶于染色桶中再加入5%的冰醋酸1000ML混匀。在室温下有效期为6个月。
2.操作步骤
2.1样品准备,:
2.1.1.SPIFE样品盘准备:将样品插条放入样品盘中的正确位置。
2.1.2加样:将准备好的供试品排好顺序;在样品盘中按顺序每孔加入17ul准备好的供试品品。每次试验需做一份血清蛋白电泳正常质控。
2.2开机
打开“SPIFE3000”电源开关。仪器自检,自动清洗并排空残留的液体。电泳显示屏上显示:
“SERUM,PROTEIN,,,21℃,,.COOL”。
打开电泳仓盖,电泳显示屏上显示:,,,INFILING。,,
自动点样器自动移动到最左端。电泳显示屏上显示:
“TO,MOVE,,APLLICATOR,LEFT,PRESS(START),,
TO,MOVE,,APLLICATOR,RIGHT,PRESS(CONTINUE)”
2.3,电泳
按照电泳显示屏上提示,按CONTINUE键,自动点样器将移动到电泳仓最右端。
将加好样品的样品盘放置于样品槽中。
按START键,自动点样器移动回样品槽中。
2.3.1刀锋放置
使用100人份/盒的试剂:刀锋放置在自动点样器上所标识的2,A,9,13,16号位置上。
使用60、30、18人份/盒的试剂:刀锋放置在自动点样器上所标识的2,8,14号位置上。
将刀锋加重块放在刀锋上面,,每个刀锋上面放一个。
2.3.2放置凝胶片
取1.0ML界面液置到电泳槽中,注意避免产生气泡。
将凝胶片从保护包装中取出,揭掉凝胶片上的保护膜,放到电泳槽中,放置时,凝胶片下面不能有气泡。
小心的用Blotter,C吸水纸吸干多余的缓冲液,用吸水纸将凝胶片和电极周围多余的界面液擦除。
2.3.3将两个碳电极棒分别放于凝胶片外侧的盐桥上,使碳棒的两极紧靠有磁性的电极。
关上电泳仓盖
按下Start/stop键启动程序,电泳显示屏上显示:
LOAD,SAMPLE1,
(START)RUN,,(CONTINUE),NEXT,OPERATION,
2.3.4一般情况下,,按“START”键,电泳仪将开始自动蘸样、点样、电泳和烘干凝胶片。但如果要从其他步骤开始操作,就要按TESE,SELECT/CONTINUE键直到你需要的操作程序出现,再按START/STOP键。蘸样和点样时,可打开电泳仓盖观察刀锋蘸样和点样的位置,如不正确,按“start/stop”停止操作,仔细检查刀锋放置位置是否正确,样品盘上的加样槽是否插紧,检查完毕,再按START/STOP键,仪器开始运行。
2.3.5烘干程序结束后,仪器将自动报警,电泳显示屏上显示:
FINISHED,PRESS(CONTINUE)TO,CONTINUE,
按“CONTINUE”键结束程序。
打开电泳仓盖,根据电泳显示屏上提示:
“TO,MOVE,,APLLICATOR,LEFT,PRESS(START),,
TO,MOVE,,APLLICATOR,RIGHT,PRESS(CONTINUE)”
2.3.6按TEST/CONTINUE键自动点样器将移动到最右端,可以取出样品盘洗净,以备下次实验使用。
2.3.7染色、脱色
将烘干的凝胶片从电泳槽中取出,用盐桥去除器铲除凝胶片上的盐桥。再将凝胶片上的圆孔
挂在支架的左边,将凝胶片的椭圆孔挂在支架的右边。放入染色槽中。
按下Start/stop键启动程序,染色显示屏上显示:,
SERUM,PROTEIN,,
DRAWING,PUMP,
10秒后,显示:,,,,,,,STAIN1
(START)RUN,,(CONTINUE)NEXT,OPERATTION
一般情况下,按“START”电泳仪将开始自动染色、脱色和烘干凝胶。但如果要从其他步骤开始操作,就要按TEST,SELECT/CONTINUE键直到你需要的操作程序出现,再按START/STOP键。
烘干程序结束后,仪器自动报警,染色显示屏上显示:
FINISHED
PLATE,OUT,GEL,HOLDER,IN,,PRESS(CONTINUE),
按“CONTINUE”键结束程序.
将染色支架从染色槽中取出,把凝胶片从染色支架上取下来,再把染色支架放回仪器。
2.3.8扫描打印结果
3.,临床意义
3.1,正常血清蛋白电泳分析,,正常血清经电泳后可分为Alb、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白及γ-球蛋白五个区带,β包括β1和β2,β2主要是C3成分。
3.2,急性感染患者血清蛋白电泳分析,急性感染患者血清蛋白电泳主要特征是Alb明显降低,α2-球蛋白增加,TP、α1、β、γ-球蛋白基本正
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