药理实验基本操作.doc

实验1 药理实验基本操作 1. 药理学实验注意事项 安全、值日。 2. 试验报告的撰写 实验报告要求结构完整、条理分明、用词规范、详略得当。 内容包含：试验题目、试验目的、实验原理、试验材料、试验方法、实验结果、讨论、结论、注意事项。 3. 药理学实验设计的三大原则 重复、随机、对照。 4. 药理学实验常用动物简介 4.1 常用种类：小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠、兔、猫、犬、猴和鸡，青蛙、蟾蜍，猴和猩猩等实验动物。 青蛙和蟾蜍易饲养，一般用其心脏，观察药物对心脏的作用；其坐骨神经腓肠肌标本可观察药物对周围神经、横纹肌或神经肌肉接头的作用，用于局麻药和肌松药的研究； 小鼠，最常用，易大量繁殖，适用于需要大量动物的试验，如半数致死量和药物的初步筛选试验； 大鼠，可用于不便用小鼠进行的试验，如血压试验；大鼠对炎症比较敏感，可用于观察药物的抗炎作用。大鼠无胆囊，便于通过胆管收集胆汁；大鼠也是新药进行长期毒性试验的常规动物； 豚鼠，用于筛选平喘药和抗组胺药，抗结核药；也常用于药物主动过敏性和被动过敏性试验研究。 新西兰兔，兔子的皮肤对刺激物的反应接近人，适用于观察药物对皮肤的局部作用；成年雌兔常用于避孕药研究；作用于心脏、血压、呼吸的药物，以及解热药和热源检查；眼用药物的药效学和药动学研究。 猫，血压试验和止咳药物的药效和机制研究等； 犬，适于慢性试验，新药临床前毒性试验，犬和猫对呕吐反应很灵敏，常用于观察药物的致吐和镇吐作用。犬也是新药进行长期毒性试验的常规动物； 猴和猩猩，高级动物，接近于人类。常用于观察药物对行为的影响。新药临床前安全性评价也需要使用猴。 4.2 我国将实验动物按照微生物控制进行等级分类 ①一级动物（普通动物，CV）：是实验动物中微生物控制要求最低的动物。外观健康，未见异常，在开放系统内饲养和繁殖。空气未经净化，动物本身所携带的微生物状况不明确，仅要求不能带有人畜共患的和导致动物烈性传染病的病原体。 比如市场买入的家鸽、猫等动物。②二级动物（清洁动物，CL）：在半屏障系统或屏障系统内饲养和繁殖。不带有动物传染病病原体，如小鼠肝炎病毒等。国外没有这个级别的动物。 比如试验用新西兰兔和豚鼠等。③三级动物，即无特定病原体动物（SPF）：在屏障系统或系统内饲养和繁殖，经检验无特殊病原菌，无传染病的健康实验动物。SPF级动物来源于无菌动物或剖宫产动物，饲养于屏障系统中，体内及环境中都不存在致病性的微生物和寄生虫，属于健康无病的动物。 现在大鼠和小鼠的常用动物都需要SPF级。④四级动物（无菌动物，GF）：在隔离系统内饲养和繁殖。体内外均无任何微生物和寄生虫。无菌动物来源于无菌剖宫产，然后将幼仔转移到绝对屏障系统——隔离器中，经人工哺育或无菌动物代乳饲养而成。 一般研究肿瘤药物，要用到这个级别的动物。 还有一种为悉生动物，也是在隔离系统内饲养，人为地将指定的微生物投入无菌动物体内形成的。级别位于三级和四级之间。 5. 基本操作 5.1 注射器的使用方法 器材：注射器 1 ml、2 ml、5 ml；针头：4号、5号、6号。一般小鼠皮下、腹腔、肌肉注射用5.0-6号针头，静脉注射用4.5号或5号针头，口服灌胃用12号针头；大鼠与兔子用16号针头。 药品：生理盐水 试验方法： 安装针头：选择适宜号数的针头，安装在针管的管嘴上，拧紧，要求针尖斜面与针管刻度面一致。 吸取药液：将针尖浸入药液中，左手持针管，右手提抽针芯，缓慢吸取药液至需要量。 ③ 排尽气泡：将吸入药液的注射器垂直向上，先抽一下针芯，使针头内的药液进入针管，并使针管内的空气汇集在药液上面，然后轻轻推动针芯，使空气自针头排出，直至溢出药液为止。若遇小气泡不易排出时，可再抽入空气少许，使该微量气泡汇合于抽入的空气中，然后一并排出（注意：避免将针头朝着自己或他人，防止液体喷射到人身上）。 ④ 持注射器： 用右手拇、中二指持注射器（针管的刻度面朝上以便观察注入的药液量）。食指固定在针头与针管接头处；进针后，用食指夹住针管，拇指推动针芯注药。 用右手拇、中二指持注射器（针管的刻度面朝上以便观察注入的药液量）。无名指固定在针头和针管接头处，食指推动针芯注药。 注意事项： 选择适宜的注射器及针头； 按接针头时须旋转90度； 针头斜面与针管刻度面一致； 排尽气泡； 注射器针头按接处需用食指或无名指固定； 注射器用后须洗净，以防药液污染； 5.2 常用动物的捉拿及给药方法 性别辨认 雌性小鼠：肛门与生殖器距离近，有阴道； 雄性小鼠肛门与生殖器距离远，有睾丸。 大鼠和新西兰兔性别辨认同小鼠。 动物的标记 小白鼠 第一、捉拿法：用右手提起鼠尾，放于粗糙物（如鼠笼）面上，并向后拉，趁小鼠用力抓住粗糙面力图向前逃跑时，以左手拇指和中指捏住其两耳及头部皮肤，食指拉