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实验1 药理实验基本操作
1. 药理学实验注意事项
安全、值日。
2. 试验报告的撰写
实验报告要求结构完整、条理分明、用词规范、详略得当。
内容包含:试验题目、试验目的、实验原理、试验材料、试验方法、实验结果、讨论、结论、注意事项。
3. 药理学实验设计的三大原则
重复、随机、对照。
4. 药理学实验常用动物简介
4.1 常用种类:小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠、兔、猫、犬、猴和鸡,青蛙、蟾蜍,猴和猩猩等实验动物。
青蛙和蟾蜍易饲养,一般用其心脏,观察药物对心脏的作用;其坐骨神经腓肠肌标本可观察药物对周围神经、横纹肌或神经肌肉接头的作用,用于局麻药和肌松药的研究;
小鼠,最常用,易大量繁殖,适用于需要大量动物的试验,如半数致死量和药物的初步筛选试验;
大鼠,可用于不便用小鼠进行的试验,如血压试验;大鼠对炎症比较敏感,可用于观察药物的抗炎作用。大鼠无胆囊,便于通过胆管收集胆汁;大鼠也是新药进行长期毒性试验的常规动物;
豚鼠,用于筛选平喘药和抗组胺药,抗结核药;也常用于药物主动过敏性和被动过敏性试验研究。
新西兰兔,兔子的皮肤对刺激物的反应接近人,适用于观察药物对皮肤的局部作用;成年雌兔常用于避孕药研究;作用于心脏、血压、呼吸的药物,以及解热药和热源检查;眼用药物的药效学和药动学研究。
猫,血压试验和止咳药物的药效和机制研究等;
犬,适于慢性试验,新药临床前毒性试验,犬和猫对呕吐反应很灵敏,常用于观察药物的致吐和镇吐作用。犬也是新药进行长期毒性试验的常规动物;
猴和猩猩,高级动物,接近于人类。常用于观察药物对行为的影响。新药临床前安全性评价也需要使用猴。
4.2 我国将实验动物按照微生物控制进行等级分类 ①一级动物(普通动物,CV):是实验动物中微生物控制要求最低的动物。外观健康,未见异常,在开放系统内饲养和繁殖。空气未经净化,动物本身所携带的微生物状况不明确,仅要求不能带有人畜共患的和导致动物烈性传染病的病原体。
比如市场买入的家鸽、猫等动物。②二级动物(清洁动物,CL):在半屏障系统或屏障系统内饲养和繁殖。不带有动物传染病病原体,如小鼠肝炎病毒等。国外没有这个级别的动物。
比如试验用新西兰兔和豚鼠等。③三级动物,即无特定病原体动物(SPF):在屏障系统或系统内饲养和繁殖,经检验无特殊病原菌,无传染病的健康实验动物。SPF级动物来源于无菌动物或剖宫产动物,饲养于屏障系统中,体内及环境中都不存在致病性的微生物和寄生虫,属于健康无病的动物。
现在大鼠和小鼠的常用动物都需要SPF级。④四级动物(无菌动物,GF):在隔离系统内饲养和繁殖。体内外均无任何微生物和寄生虫。无菌动物来源于无菌剖宫产,然后将幼仔转移到绝对屏障系统——隔离器中,经人工哺育或无菌动物代乳饲养而成。
一般研究肿瘤药物,要用到这个级别的动物。
还有一种为悉生动物,也是在隔离系统内饲养,人为地将指定的微生物投入无菌动物体内形成的。级别位于三级和四级之间。
5. 基本操作
5.1 注射器的使用方法
器材:注射器 1 ml、2 ml、5 ml;针头:4号、5号、6号。一般小鼠皮下、腹腔、肌肉注射用5.0-6号针头,静脉注射用4.5号或5号针头,口服灌胃用12号针头;大鼠与兔子用16号针头。
药品:生理盐水
试验方法:
安装针头:选择适宜号数的针头,安装在针管的管嘴上,拧紧,要求针尖斜面与针管刻度面一致。
吸取药液:将针尖浸入药液中,左手持针管,右手提抽针芯,缓慢吸取药液至需要量。
③ 排尽气泡:将吸入药液的注射器垂直向上,先抽一下针芯,使针头内的药液进入针管,并使针管内的空气汇集在药液上面,然后轻轻推动针芯,使空气自针头排出,直至溢出药液为止。若遇小气泡不易排出时,可再抽入空气少许,使该微量气泡汇合于抽入的空气中,然后一并排出(注意:避免将针头朝着自己或他人,防止液体喷射到人身上)。
④ 持注射器:
用右手拇、中二指持注射器(针管的刻度面朝上以便观察注入的药液量)。食指固定在针头与针管接头处;进针后,用食指夹住针管,拇指推动针芯注药。
用右手拇、中二指持注射器(针管的刻度面朝上以便观察注入的药液量)。无名指固定在针头和针管接头处,食指推动针芯注药。
注意事项:
选择适宜的注射器及针头;
按接针头时须旋转90度;
针头斜面与针管刻度面一致;
排尽气泡;
注射器针头按接处需用食指或无名指固定;
注射器用后须洗净,以防药液污染;
5.2 常用动物的捉拿及给药方法
性别辨认
雌性小鼠:肛门与生殖器距离近,有阴道;
雄性小鼠肛门与生殖器距离远,有睾丸。
大鼠和新西兰兔性别辨认同小鼠。
动物的标记
小白鼠
第一、捉拿法:用右手提起鼠尾,放于粗糙物(如鼠笼)面上,并向后拉,趁小鼠用力抓住粗糙面力图向前逃跑时,以左手拇指和中指捏住其两耳及头部皮肤,食指拉
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