2011 第六章 酶概论课件.pptVIP

第五章 酶(Enzyme) 引言----酶的研究历史 １．19世纪中叶对发酵本质的探讨： 1833年Payan 和 Persoz：从麦芽的水提物中得到淀粉糖化酶 19世纪70年代 Pasteur：发酵是酵母细胞活动的结果。 1878年kühne: 命名Enzyme----- “在酵母中”  2、关于酶的化学本质的认识： 1926 Summer：首次从刀豆中得到脲酶结晶，并证明其化学本质是蛋白质，和Northrop 分享了1949年的诺贝尔化学奖。 1982 T. Cech和S.Altman从四膜虫发现rRNA的自身催化作用，并提出了核酶（ribozyme）的概念。获1989诺贝尔化学奖． 1903年,Henri和Wurtz提出中间络合物学说 1913年,Michaelis 和 Menton 米氏方程。 1925年,Briggs和Haldane提出稳态平衡理论. 一、　酶学概论 (一)、酶的概念及其作用特点 1、概念 ①酶是生物体活细胞产生的具有特殊催化活性和特定空间构象的生物大分子，包括蛋白质及核酸。 ②酶是一类具有高效率、高度专一性、活性可调节的生物催化剂。 降低反应活化能（P320，活化分子增多） 高度专一性（特异性） 一种酶只作用于一种或一类化合物，以促进一定的化学变化，生成一定的产物，这种现象称为酶作用的特异性。 （2）酶易失活，需温和的反应条件 　　　 （3）高度专一性 证据 酶经酸水解产物为氨基酸，能被蛋白酶水解而失去活性 具有蛋白质的一切共性 变性导致失活 两性电解质,具有等电点 胶体性质 颜色反应 ２．少数酶是RNA和DNA 20世纪80年代Altman和Cech几乎同时发现某些RNA有催化活性(Ribozyme)，甚至有些DNA也有催化活性，使酶是蛋白质的传统概念受到很大冲击。 DNA 的催化活性见于原始生命形式的病毒到高等动物鱼类及高等植物如小麦的DNA分子。 (二)酶的化学组成 单纯蛋白质：不含其他物质 缀合蛋白质 全酶=脱辅酶+辅因子 酶的辅助因子 　酶的辅助因子主要有金属离子和有机化合物 　金属离子：Fe2+、Fe3+ 、Zn2+、Cu+、Cu2+、Mn2+、Mn3+、Mg2+ 、K+、Na+ 、Mo6+ 、Co2+等。 　有机化合物：NAD，NADP，FAD，生物素等 (三).酶的类型 1、单体酶: 种类少，由一条多肽链组成.分子量较小. 2、寡聚酶: 由几个甚至十几个亚基组成,亚基可相同也可不同,亚基间不以共价键相连.分子量较大. 大多数聚合形式是活性型。 3、多酶复合体: 由几种酶依靠非共价键方式彼此嵌合形成的复合体,催化一系列反应连续进行.这类酶复合体分子量很高,一般在几百万以上。 （二）、酶的国际系统命名法 底物1：底物2 XX酶 底物是水时可省略 （三）、酶的国际系统分类法及编号（EC编号） （三）酶的分类 根据酶所催化反应的性质，由酶学委员会规定，将酶分为六大类： 1、氧化还原酶类: 2、转移酶类: 3、水解酶类: 4、裂合酶类: 5、异构酶类: 6、合成酶类: 4.裂合酶类（lyases) 裂合酶催化从底物分子中移去一个基团或原子形成双键的反应及其逆反应。通式： AB→A+B 5.异构酶类(isomerases) 异构酶催化各种同分异构体的相互转化，即底物分子内基团或原子的重排过程。 通式：A→B 其中：A、B为同分异构 1．绝对专一性： 一种酶只能作用于一种化合物，以催化一种化学反应，称为绝对特异性。 2．相对专一性： 一种酶只能作用于一类化合物或一种化学键，催化一类化学反应，称为相对特异性。 3．立体异构专一性： 一种酶只能作用于一种立体异构体，或只能生成一种立体异构体，称为立体异构特异性。 1 锁钥学说 认为整个酶分子的天然构象是具有刚性结构的，酶表面具有特定的形状。酶与底物的结合如同一把钥匙对一把锁一样 2 诱导契合学说 该学说认为酶表面并没有一种与底物互补的固定形状，而只是由于底物的诱导才形成了互补形状. 大多数认可。 五 酶的活力测定与分离提纯 （一）、酶活力与酶促反应速度 酶活力(enzyme activity): 也称酶活性,是指酶催化一定化学反应的能力。 酶活力的大小可以用在一定条件下所催化的某一化学反应的反应速度来表示，两者呈线性关系。 酶促反应速度：单位时间、单位体积中底物的减少量或产物的增加量。 单位：浓度/单位时间 （四）、酶活力的测定方法 分光光度法(Spectrophotometry) 利用底物和产物在紫外或可见光部分的光吸收的不同，选择一适当的波长，测定反应过程中反应进行的情况。 荧光法(Fluor