HIV抗体筛查试验体会_宣武医院课件.pptVIP

 HIV抗体筛查试验体会及经验交流 宣武医院艾滋病筛查实验室 李秀玉 首都医科大学宣武医院艾滋病防治工作制度 工作小组及工作职责 （一）工作小组 组 长：主管院长 副组长：门诊部主任、保健科主任 组 员：皮肤性病科主任、妇产科主任、泌尿外科主任、检验科主任、医院感染管理科（副）主任、健康教育科负责人、门诊部护士长 （二）工作职责 负责我院艾滋病防治的管理工作。督导艾滋病诊断、登记、报告、实验室初筛、宣传教育、专业培训等工作的落实。 检验科 初筛HIV阳性 保健科 接到检验科通知 标本送至 市CDC 门急诊 初筛阳性病人 住院 初筛阳性病人 市CDC 确证HIV阳性 皮肤性病科 流调、告知签字 保健科协助病房 流调、告知签字 检验科到市CDC 取报告、复印报告 保健科 接到检验科通知 门急诊 确证阳性病人 住院 确证阳性病人 病房主管医生 填报传染病卡 通知病人取 确证报告 保健科填报传染病卡（非皮科） 皮肤性病科 填报传染病卡 通知所有门诊 病人取确证报告 保健科 统一网报 宣武医院HIV抗体初筛阳性流调告知及确证阳性报告流程图 样　　品 初筛 试验 一阴一阳 均阳性反应 报告阴性 确证试验 复检试验 报告阴性 均阴性反应 阳性 反应 原有试剂＋另一 不同原理（或厂家） 试剂或另外两种不同 原理（或厂家） 试剂 选用筛查试剂 阴性反应 HIV抗体筛查检测流程图 HIV筛查实验室的SOP文件 人类免疫缺陷病毒抗原抗体（万泰）检查标准操作程序（SOP） 人类免疫缺陷病毒抗体（丽珠）检查标准操作程序（SOP） XD711酶标分析仪标准操作程序（SOP） Thermo Wellwash 4 MKⅡ型自动洗板机标准操作程序（SOP） 生物安全手册 艾滋病实验室安全防护和职业暴露预防程序(SOP) HIV标本接收 样本接收：每个检测标本均有唯一电子条码标识，经检验科扫码确认接收，信息经过LIS系统编辑，自动生成HIV检测信息名单，并在信息中心有备份。 信息包括患者姓名，年龄，科室等，本筛查实验室已经取消手工登记，可随时打印电子版。 HIV抗体筛查检测试剂盒 HIV抗体初筛试剂盒 万泰四代试剂盒 HIV抗体复检试剂盒 丽珠三代试剂盒 HIV抗体快速检测试剂 雅培金标试剂 仅用于HIV初筛质评 万泰金标试剂 HIV初筛试剂盒（万泰四代） HIV Ag检测 : HIV Ag 固相 血清 /血浆 结合物1/结合物2 HIV 1 Ab : 抗p24单克隆抗体………..… 生物素标记的抗HIV单克隆抗体 过氧化物酶标记的亲和素 TMB/H2SO4 P 在同一孔中同时 检测HIV Ab: IgG, IgA, IgM 固相 血清 / 血浆 结合物1 HIV 1 Ag : gp 160 重组抗原 ……………………………….. 过氧化物每标记的gp 41肽段 f功能性保守肽段 ………………….过氧化物每标记的f功能性保守肽段 HIV 2 Ag: gp36 肽段 …………………………………..过氧化物每标记的gp 36肽段 TMB/H2SO4 P 第四代HIV酶免试剂的实验原理 HIV酶免四代诊断试剂的窗口期 infectivity 3rd gen 1st-2nd gen HIV antigen IgM ab IgG ab Detection limit = window 4th 3周 2周 1个月 HIV抗原抗体联合检测（万泰四代） 1. 按照所需数量在板架上放好酶标板条. 2. 设3孔阴性对照，2孔质控，1型、2型、抗原阳性对照共3孔 3. 每孔加入20ul生物素试剂. 4. 每孔加入100ul样品、对照或质控，轻轻震荡. 4. 37℃孵育60分钟. 5. 洗板5次.拍干. 6. 加入100ul酶标记物. 7. 37℃孵育30分钟. 8. 洗板5次.拍干. 9. 每孔加入显色剂A、B各50ul，轻轻震荡混匀 10. 37℃孵育30分钟. 11. 每孔加入50ul终止液，10分钟内测结果 12. 在450nm/620nm双波长下读数. 13. 计算界限值: 界限值(Cut-off)=阴性对照平均值+0.12 14. 判断结果：大于等于界限值判为阳性, 小于界限值判为阴性. HIV抗体检测（丽珠）实验程序 1. 按照所需数量在板架上放好酶标板条,撕去封条. 2. 设阴性对照3孔，HIV-1阳性对照2