5.2修改多聚酶链式反应扩增DNA概论.ppt

PCR反应过程可分为三步： 变性、复性（退火）、延伸 1．变性 双链模板DNA解离为单链结构。（90～95℃） DNA 双链 DNA 单链 变性（ 95℃） 2．复性 （55 ℃） 引物与模板互补成双链。 (由于引物浓度高，序列短，所以易与模板结合。) PCR反应过程可分为三步：变性、复性、延伸 引物 PCR反应过程可分为三步：变性、退火、延伸 3．延伸 在Taq酶作用下，合成特异DNA序列。70～75℃ 延伸（72℃） 变性 第二次循环 复性 第二次循环 延伸 第二次循环 ① ② ③ ④ 25次 PCR 循环的结果 ② DNA聚合酶只能特异性地复制处于两个引物之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增 ①从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，并且由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合，进行DNA的延伸 课前预习导学 KEQIAN YUXI DAOXUE 课堂合作探究 KETANG HEZUO TANJIU 问题导学 当堂检测 ① PCR过程需要的引物不是RNA，而是人工合成的DNA单链，其长度通常为20－30个脱氧核苷酸 细胞内复制和PCR不同点 ② PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶，而是通过对反应温度的控制来实现的 细胞内复制 .VS. PCR扩增 DNA母链 4种　dNTP Taq DNA聚合酶