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3.2 体外受精和早期胚胎培养 1978年7月26日,世界首例试管婴儿“路易斯.布朗”在英国诞生,现已成为母亲。 1988年3月10日中国首例试管婴儿郑萌珠 1992年我国首例三胞胎试管婴儿 1982年世界首例试管牛犊问世 我国首例转基因试管牛“滔滔”于1999年2月19日在上海诞生。 1984年世界首例试管山羊顺利诞生。 国产奶牛:年均产奶量3吨左右 国际良种奶牛:年均产奶量10吨左右 引进一头良种成年奶牛需要3万-5万元; 牛的生育率低,一头牛一胎只生一只,一生只能生育四五次。 思考探究:你有什么办法实现我国良种牛的快速大量繁育吗? 从试管牛说起 通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经过移植产生后代的技术。 试管动物技术 发展这种技术意义何在? 大量快速繁殖良种家畜。 哺乳动物体内胚胎的形成需要经过哪些过程? 精子和卵子的发生——受精——胚胎的发育 哺乳动物体外胚胎的发育需要完成哪些环节? 获得精子和卵子——体外受精——体外胚胎培养 画出“试管牛”工厂化生产的技术流程图解 “试管牛”工厂化生产的技术流程图 采集良种母牛的卵母细胞 体外培养 采集良种公牛精子 体外获能 体外受精 胚胎早期培养 良种牛体外受精胚胎 胚胎移植 受体牛 良种犊牛 成熟期牛 屠宰加工厂 市场 采集卵巢中的卵母细胞 一、体外受精 1.卵母细胞 2.精子 3.受精 二、早期胚胎培养 1.采集的方法有哪些? 2.采集到的细胞能直接受精吗? 1.采集的方法有哪些? 2.采集到的精子能直接和卵子受精吗? 在体外受精要准备什么条件? 在体外如何培养胚胎? 1.卵母细胞的采集和培养 用促性腺激素注射处理后,从输卵管中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。 如:小鼠、兔、猪、羊等 方法一: 超数排卵法 方法二: 从屠宰的母畜卵巢中直接采集卵母细胞。 适用于大家畜和大动物,如牛 牛卵巢中采卵 牛卵巢 方法三: 借助超声波探测仪、内窥镜、腹腔镜等工具,从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。 适用于大家畜和大动物,如牛 B超活采仪 活体采卵 B超引导法: 操作员先将带有超声波探头和采卵针的采卵器通过阴道插入子宫,同时通过将卵巢贴在探头上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置,利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。 方法二和三采集的卵母细胞需经体外人工培养成熟。 活体采集的牛卵母细胞 卵母细胞的成熟培养:CO2培养箱 培养箱 2.精子的收集和获能 1) 收集的方法: 1.假阴道法:体型较大的牲畜。 2.手握法: 适用于体型较小容易控制的动物,如猪犬等。 3.电刺激法:适用于野生或经济动物。 2) 获能处理: 培养法:把精子放入获能液中。 (适用对象:啮齿动物、家兔和猪) 化学诱导法:把精子放入一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中,化学药物诱导。 (适用对象:牛、羊) 3.受精 在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。 三、胚胎的早期培养 1.受精卵的发育培养: 检查受精状况和受精卵的发育能力。 2.培养液的成分: 无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等 3.适时移植: 向受体移植或冷冻保存。 两盐:无机盐和有机盐 两素:维生素、激素 两酸:氨基酸、核苷酸 一血清 不同动物胚胎移植时间不同 牛、羊:桑椹胚或囊胚阶段 小鼠、家兔:卵裂期或囊胚阶段 试管婴儿:8个或16个细胞阶段 保存剩余的卵子和精子的方法是什么? 有性生殖 无性生殖 遵循 试管动物 克隆动物 生殖方式 技术手段 遗传物质 遗传规律 比较试管动物和克隆动物 来自2个个体 主要来自核供体 不遵循 动物细胞培养 体外受精 胚胎移植 动物细胞培养、 核移植技术、 胚胎移植 试管动物技术 体外受精 早期胚胎培养 卵母细胞的采集 精子的获取 受精: 条件: 培养液成分: 假阴道法 手握法 电刺激法 方法一:用促性腺激素处理,使其超数排卵,从输卵 管中冲取卵子 方法二:从屠宰母畜卵巢中采集 方法三:直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞 受精卵在发育培养液中培养 无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等 获能的精子 +培养成熟的卵子 完成受精 课内小结 * * * * * *
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