3_生物制品的制备2013.ppt

（二）分泌型的表达产物 分泌型的表达产物通常体积较大、浓度较低，必须在纯化以前进行浓缩 浓缩方法包括：沉淀、超滤 （三）细胞内可溶性表达产物 （四）细胞周质表达蛋白 周质表达的蛋白是介于细胞内可溶性表达和分泌型表达之间的一种表达形式，它可以避开细胞内可溶性蛋白和培养基中蛋白类杂质，在一定程度上有利于蛋白产物的分离纯化。 为了获取周质蛋白，大肠杆菌细胞经低浓度溶菌酶处理后，一般用渗透压裂解法获取。 由于周质中的蛋白仅有为数不多的几种分泌蛋白，同时又无蛋白水解酶的污染，因此通常能够回收到高质量的蛋白产物。 一、原材料的质量检测与控制 原材料的质量控制是要确保编码生物制品的DNA序列的正确性，重组微生物来自单一克隆，所用质粒纯而稳定，以保证产品质量的安全性和一致性。 第四节 生物制品的质量检测与控制 在工程菌菌种贮存中，要求种子克隆纯而稳定； 在培养过程中，要求工程菌所含的重组质粒稳定，始终无突变； 在重复生产发酵中，工程菌表达稳定；始终能排除外源微生物污染。 二、培养过程的质量控制 产品应有种子批系统，并证明种子批不含致癌因子，无细菌、病毒、真菌和支原体等污染，并由原始种子批建立生产用工作细胞库。 原始种子批须确证克隆基因DNA序列，详细叙述种子批来源、方式、保存及预计使用期，保存与复苏时宿主载体表达系统的稳定性。 产品要有足够的生理和生物学试验数据，确证提纯物分子批