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* 动物组织中核酸的提取及其组成成分的鉴定 生物化学与分子生物学实验 CQMU 李梨 博士，副教授 【实验目的】 学习离心技术，掌握离心机的正确使用 掌握动物组织核酸的提取及组成成分鉴定的原理与操作 【实验思路】 动物肝组织 分离 水解核酸 核酸沉淀物 戊糖、磷酸、碱基 分别鉴定 【实验目的】 了解本实验设计思路 学习离心技术，掌握离心机的正确使用 氨基萘酚磺酸 浓酸 【鉴定的原理】 核糖 糖醛 + 3，5二羟甲苯（地衣酚） 绿色复合物 3H2O 磷酸 + 钼酸铵 磷钼酸 还原 钼兰（兰色） 脱氧核糖 浓酸 ω-羟基γ-酮基戊醛 + 二苯胺 3H2O 兰色化合物 嘌呤碱基 + 硝酸银 灰褐色絮状嘌呤银化合物 【操作】 1.分离抽提 4ml肝匀浆倒入刻度离心管 立即加入2%三氯醋酸4ml,搅匀 离心（3000转/分，3分钟） 倾去上清液 沉淀物中加入10%NaCl溶液4ml,搅匀 置于沸水浴中加热5分钟，用玻棒不断搅拌 取出再离心 （3000转/分，3分钟） 将上清液倒入小烧杯内 取4ml 95%乙醇， 逐滴滴加并边加边摇 白色沉淀物，静置3分钟，转入离心管 再离心 （3000转/分，3分钟） 倾去上清液，即得到核酸钠的白色沉淀 2.核酸水解 加入5%H2SO4溶液4ml 用玻棒搅匀，在沸水中加热5分钟 核酸水解液 3.RNA和DNA成分鉴定 （1）磷酸的鉴定： 取试管2支，分别作为测定与对照。 5滴 5滴 钼酸胺试剂 20滴 20滴 氨基萘酚磺酸 静置数分钟后观察现象 10滴 —— 5% H2SO4 —— 10滴 水解液 对照 测定 （2）核糖的鉴定：取试管2支。 6滴 6滴 3，5二羟甲苯 沸水浴加热数分钟后观察现象 4滴 —— 5% H2SO4 —— 4滴 水解液 对照 测定 * * *
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