第五章 蛋白质-1课件.ppt

4．侧链R基参加的反应 （1）-S-S-和-SH的氧化还原反应 半胱氨酸的-SH很活泼，很容易在空气中重新氧化形成二硫键。 （2）苯环的黄色反应 Tyr or Trp+浓HNO3→黄色 phe+少量浓H2SO4+浓HNO3→黄色 （3）酚基的Millon反应（米伦氏反应） （4）吲哚基的乙醛酸反应 （5）胍基的sakaguchi反应（坂口反应） （6）pauly反应 （7）Folin一酚反应 （8）紫外吸收：Trp、Tyr、(phe) （9）荧光： Trp、Tyr（phe） （五）氨基酸的分析 1．? 分配层析的原理 根据被分析的样品在两种互不相溶的溶剂中分配系数的不同而达到分离的目的. 固定相：静态 固相，液相，固－液混合相（半液体） 流动相：动态 液相，气相? CA：一种物质在A相（流动相）中的浓度 CB：一种物质在B相（固定相）中的浓度 （1）纸层析 （2）聚酰胺薄膜层析 （3）薄层层析 2．离子交换层析法 支持物：离子交换树脂 各种离子交换能力不同，与树脂结合的牢固程序就不同，在洗脱过程中，各种离子以不同的速度移动，从而达到分离的目的。 这种分离主要与各种离子所带电荷有关，在电荷相同时，与极性，非极性有关。 离子交换树脂： 人工合成的聚苯乙烯一苯二乙烯组成的具有网状结构的高分子聚合物。 阳离子交换树脂：活性基团是酸性的，如磺酸基-SO3H （强酸型），羧基-COOH（弱酸型） 阴离子交换树脂：活性基因是碱性的，如季胺基- N+(CH3)3OH- 茚三酮显色，仪器灵敏度10-9mol OPA（邻苯二甲醛）；荧光胺,灵敏度10-12mol。 3．高效液相层析（high performance liguid chromatography, HPLC） HPLC的特点：高效、快速 灵敏度：10-12 mol （六）氨基酸的制备 1．蛋白质水解 （1）酸水解 （2）碱水解 （3）酶水解 2．人工合成 3．微生物发酵 三、肽（peptide） （一）肽的结构和命名 肽是由两个或两个以上的氨基酸通过肽键连接而形成的化合物。 2个氨基酸 二肽 3个氨基酸 三肽 十个氨基酸以下 寡肽 多个氨基酸 多肽 * * ? 蛋白质(protein)一词由19世纪中期荷兰化学家穆尔德(Gerardus Mulder)命名。当时，穆尔德从动物组织中和植物体液中提取出一种共同的物质，他认为这种物质存在于有机界的一切物质中。根据瑞典著名化学家贝采里乌斯(Berzelius)的提议，将这种物质命名为蛋白质。蛋白质是一类含氮的生物高分子，分子量大，结构复杂。例如，血红蛋白的分子式是C3032H4816O812N780S8Fe4。? 蛋 白 质 Protein 一、组成和分类 1．? 组成 C、H、O、N（S、P、Cu、Fe、Mo、I） ? 氮含量平均：16％――凯氏定氮法 含氮量×6.25＝蛋白质含量 ? 简单蛋白质：仅由氨基酸组成 缀合蛋白质：除氨基酸外，含有其它化学成分（辅基或配体） 2.分类 （1）? 单纯蛋白质：按溶解度分类 （2）? 缀合蛋白质：非氨基酸成分进行分类 （3）? 按生物学功能进行分类 ?（一）?? 氨基酸的结构通式 二、蛋白质的基本结构单位――氨基酸 蛋白质的水解产物―――20种常见氨基酸（19种氨基酸和1种亚氨基酸） 不同的氨基酸在于R测链的不同 D-型 L－型 ? （1）Cа为手性C，具有旋光性。（Gly除外） 蛋白质中的氨基酸均为L－型 （2）pH中性时，氨基酸以兼性（两性）离子形式存在 （3）а－氨基酸均为白色晶体，熔点很高 （4）除了Pro和Tyr以外，均溶解于水 （5）在紫外区（280nm）有吸收，TrpTyrPhe （二）氨基酸的分类 参与蛋白质合成的只有20种，称为蛋白质氨基酸，其余称为非蛋白质氨基酸。 氨基酸的表示方法：三字母、单字母 （1）按照R基的化学结构进行分类 ? 脂肪族氨基酸：1，中性氨基酸： Gly、Ala、Val、Leu、Ile （一氨基一羧基） 含－OH：Ser、Thr 含S：Cys、Met 2，酸性氨基酸及其酰胺：Asp、Asn、Glu、Gln (一氨基二羧基) 3