蛋白质的生物合成分子生物学课件.ppt

? 真核蛋白的降解依赖于一个 只有76个氨基酸残基、其序列 高度保守的泛素(Ubiquitin)。 ? 细胞内即将被降解的蛋白首 先在ATP的作用下与泛素相连 （需要E1(连接泛素), E2(负责 将泛素从E1转移到底物), E3( 结合底物蛋白)三个降解因子 的参与），并将该复合体运送 到特定的蛋白降解体系(蛋白 酶体)中直到完全降解。 ? 成熟蛋白N-端的第一个氨基酸（除已被切除的N 端甲硫氨酸之外，但包括翻译后修饰产物）在蛋白 的降解中有着举足轻重的影响。 ? 当某个蛋白质的N端是甲硫氨酸、苷氨酸、丙氨酸 、丝氨酸、苏氨酸和缬氨酸时，表现稳定。 ? 其N端为赖氨酸、精氨酸时，表现最不稳定，平均 2-3分钟就被降解了。 蛋白质的半衰期与N-端氨基酸残基的关系 N-端残基 稳定型残基 甲硫氨酸、苷氨酸、丙氨酸、 丝氨酸、苏氨酸、缬氨酸 不稳定型残基 异亮氨酸、谷氨酰胺 酪氨酸、谷氨酸 脯氨酸 亮氨酸、苯丙氨酸、 天门冬酰胺、赖氨酸 精氨酸 半衰期 20h ～30min ～10min ～7min ～3min ～2min 从DNA到蛋白质 泛素化 Ubiquitylation ? Ubiquitylation is the covalent attachment of ubiquitin to the ε-amino group of lysines via isopeptide bonds(异肽键). ? Polymeric ubiquitin chains usually target proteins for proteasomal degradation, whereas monoubiquitylation can control various functions. ? A hierarchical cascade connecting an activating enzyme (E1) with several conjugating enzymes (E2) and protein ligases (E3) mediates ubiquitin transfer to a protein. Enzymes and reactions of the ubiquitin/proteasome system. ?The E1 catalyzes the formation of a ubiquitin thiol ester in an ATP- dependent reaction. ?The thiol-linked ubiquitin can then be transferred to an E2 in the conjugation reaction. ?The ligation reaction is promoted by ubiquitin ligases, or E3 proteins. ?Ubiquitination may be reversed by de-ubiquitinases (DUBs). The crystal structures of E3 ligase and the complex of E3 ligase with its substrate DDB1–CUL4A–ROC1泛素连接酶与猴病毒 5的V蛋白复合物的晶体结构. Angers, et al., Nature, 2006, 443:590. SCFSkp2–E2复合物的结构. Zheng, et al., Nature, 2002, 416:708.) A Diverse Array of Ubiquitin Chain Linkages Can Lead to Different Outcomes for the Substrate Protein and Result in Different Cellular Responses The regulation of p53 by the ubiquitin system illustrates the complex interplay between DUBs and E3 ligases By regulating p53 levels through their deubiquitinating activities, USP7