113第十三章基因工程抗体16张幻灯片.ppt

第十三章 基因工程抗体 抗体研究的世代 第一代 多克隆抗体 第二代 单克隆抗体 第三代 基因工程抗体 一.多克隆抗体（polyclonal antibody）： 指由不同B细胞克隆产生的针对抗原物质中多种抗原决定簇的多种抗体混合物。 如:免疫血清（含多种特异性抗体）。 实际意义： （1）预防、治疗感染性疾病 如：破伤风抗毒素血清 ? 抗破伤风 胎盘球蛋白 ? 抗病毒感染 （2）临床诊断，缺点：特异性差。 二.单克隆抗体（monoclonal antibody, McAb） 由单一克隆B细胞杂交瘤产生的，只识别抗原 分子某一特定抗原决定簇的特异性抗体。 特点：具有高度均一性。 杂交瘤细胞： 骨髓瘤细胞 无限增殖； 免疫B细胞 合成、分泌特异性抗体。 鼠源单抗临床应用的障碍 血清半衰期短，20h 抗原抗体结合力、亲和力不够 HAMA反应：8－10天出现，20－30天高峰，anti-id封闭与抗原结合位点，抗鼠抗体加速单抗清除。 过敏休克　 基因工程抗体 单克隆抗体在诊断和治疗中具有重要的作用。但是鼠源性的单抗用于临床治疗易产生人抗鼠抗体（Human anti-Mouse Antibody,HAMA)。利用基因工程技术，对抗体进行改造，减少鼠源性的成分，增加人源化的成分。利于单抗的临床应用。 2002年完全人源化单抗humira获得批准上市，这是单克隆抗体药物发展具有里程碑意义的大事，预示着单克隆抗体药物一个迅猛发展的新时代的来临。Humira是Abbott/CAT公司开发的一种治疗类风湿关节炎的单克隆抗体药物。 治疗型单克隆体－基因时代明星 2007年4月3?日 　国内单抗药物发展迅速，上市的单抗药物有11个，其中我国自行开发的有6个，处于临床研究阶段的有5个。 已批准上市的单抗 正在进行临床开发中的基因工程抗体 武汉生物制品研究所研制的注射用鼠源性抗人T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体是国内自行研制最早批准上市的抗体；北京百泰生物与古巴合作开发的I类癌症治疗新药“重组人源化抗人表皮生长因子受体单克隆抗体”(商品名：泰欣生)是我国批准的第一个人源化单克隆抗体药物； 第四军医大学、成都华神联合研制的美妥昔单抗注射液(商品名：利卡汀)是全球第一个用于治疗原发性肝癌的药物，也是我国第一个具有自主知识产权的抗体类药物。 FDA批准（1998） 生物制品许可申请 蛋白质设计 FDA批准 Ⅰ/Ⅱ Humanized (IgG1) Humanized　(IgG1) M195 Chimeric (IgG1) Humanized(IgG) Herceptin Campath1/ ( LDP03) Smart Rituxan LymphoCide HER2/neu CD52 CD33 CD20 CD22 乳腺病 慢性淋巴细胞白血病 急性粒细胞白血病 非何杰金淋巴瘤 临床阶段 抗体来源 抗体名称 靶抗原 适用病症 Ⅰ Ⅱ/Ⅲ Ⅱ Humanized Radiolabelled murine Murine Smart 1D10 Oncolym (Lym-1) TriGem HLA HLA DR 抗id(GD2)* 非何杰金淋巴瘤 黑色素瘤 临床阶段 抗体来源 抗体名称 靶抗原 适用病症 * 影响单抗与靶细胞或抗原结合 引起变态反应和器官损害 HAMA反应的示意图 第二节 鼠单抗的人源化 1.人鼠嵌合抗体： 鼠单抗的可变区序列＋人抗体恒定区序列 2.利用计算机辅助设计，通过定点突变，改变 可变区的氨基酸，减少鼠源性。 1 人一鼠嵌合抗体(Chimeric Antibodies) 人一鼠嵌合抗体是将鼠源单抗的可变区与人抗体的恒定区融合而得到的抗体。 构建嵌合抗体的大致过程是，将鼠源单抗的可变区基因克隆出来，连到包含有人抗体恒定区基因及表达所需的其它元件(如启动子、增强子、选择标记等)的表达载体上，在哺乳动物细胞(如骨髓瘤细胞、CHO细胞)中表达。 构建重组表达载体 2 鼠单抗可变区的人源化 尽管嵌合抗体的免疫原性已降低很多，但有时它仍可能引发较强的免疫反应。为了进一步降低抗体的鼠源成分，发展出CDR移植技术。 CDR移植即把鼠抗体的CDR序列移植到人抗体的可变区内，所得到的抗体称CDR移植抗体或改型抗体，也就是人源化抗体。 经过CDR移