第4章 病毒解说.pptVIP

2、可能会失去溶源性 3、有些新的特性 4、少部分原噬菌体可自发脱离细菌染色体，变为烈性噬菌体 5、用指示菌株才能察觉游离噬菌体的存在 6、溶源性菌株的命名 如：E.coli K12(λ)即大肠杆菌K12是温和噬菌体λ的溶源性菌株，或λ噬菌体是一种温和噬菌体，寄生在大肠杆菌K12中。 7、许多动植物病毒能建立潜伏性感染，被感染寄主并不表现出特异性病症，其机理可能类似于溶源性细菌。 三 一步生长曲线 1.一步生长规律 即病毒的增殖规律，其特点是感染细胞至复制组装完成之前，在细胞外是检测不到病毒的，一旦细胞裂解，病毒大量释放，数量直线上升。 2.一步生长曲线的制作 病毒的一步生长曲线 感染后到噬菌体释放前的这段时间称为 潜伏期（隐蔽期）。潜伏期的噬菌斑数就是感染噬菌体的细菌数，释放期的噬菌斑数就是噬菌体的释放数。把潜伏期前的噬菌斑数除释放期的噬菌斑数就是噬菌体的裂解量。通常，大肠杆菌T4噬菌体的裂解量为100。裂解量的大小与种类和条件有关。 一步生长曲线的研究，首先在噬菌体中进行，但也适用于动植物病毒。 第二节 病毒的感染 影响感染的因素——病毒、机体及环境条件 病毒的致病性和毒力直接影响病毒感染的表现和结果 机体的年龄、生理状态、营养状况和免疫能力等都影响着病毒的感染过程 机体生存所处的环境、气候条件等因素影响着病毒的感染过程 感染类型 依据症状明显程度分为显性感染和隐性感染； 依据病原传播特点分为传染性和非传染性感染； 依据病原来源分为外源性和内源性感染； 依据感染发生部位分为局部感染和系统感染； 依据病程长短分为急性感染和慢性感染 侵入途径（体外传播途径） 通过空气、食物、水、昆虫、寄生虫等 媒介，或经呼吸道、消化道、泌尿生殖道、皮肤等途径在人群或动物个体间传播为水平传播。 比如，多数水生动物病毒，人类乙肝病毒、HIV病毒等，都属于水平传播型 病毒经由胎盘或产道由亲代传给子代的方式为垂直传播。 比如，风疹病毒、巨细胞病毒、乙肝病毒、HIV病毒等 理化因素对病毒的影响 温度： 病毒耐冷不耐热，56-60℃加热30min即失活 pH： pH5.0-9.0间稳定，小于5.0、大于9.0易失活 射线： X、γ射线，紫外线，高能粒子均可杀灭病毒 脂溶剂： 脂溶剂尤其是乙醚对包膜病毒破坏明显 化学消毒剂： 高锰酸钾、次氯酸盐、氯化汞、酒精、强酸、强碱能有效杀死病毒； 1%苯酚仅对少数病毒有效，饮用水中的次氯酸钙对乙肝病毒和肠道病毒无效 抗生素和中草药： 抗生素对病毒无抑制作用，有些中药如板蓝根、大青叶、柴胡、大黄、贯仲等对部分病毒有抑制作用 一、病毒的分离和纯化(以噬菌体为例) 目的：找到对特定的宿主具感染力的病毒；鉴定某种病毒 （一）、噬菌体的分离 1、培养敏感菌 如培养大肠杆菌； 2、增殖噬菌体 所采集样品与大肠杆菌培养液一起培养； 3、制备裂解液 离心、过滤，取少量滤液作无菌试验，以证明除菌彻底； 4、验证噬菌体的存在 将滤液滴加在涂有大肠杆菌的平皿上看是否有噬菌斑，应用生理盐水作对照； 第三节 病毒的检测 1、将含有噬菌体的滤液稀释，倒双层平板，挑取典型的噬菌斑接种、培养，重复操作，直至在平板表面的菌苔中出现形状和大小完全一致的噬菌斑时，才可认为获得了较纯的大肠杆菌噬菌体。 2、增殖噬菌体。 3、去除菌体。 （二）、噬菌体的纯化 噬菌体的效价即每毫升所含有感染噬菌体的粒子数。表示方法有两种：一种是以在液体试管中能引起溶菌现象（即菌悬液由浑浊变为澄清）的最高稀释度来表示；另一种则以在平板菌苔表面形成的噬菌斑数再换算出每毫升原液中的噬菌体数来表示，公式为： 效价值＝噬菌斑数/取样量·稀释度 （三）、计算噬菌体的初步效价 例如当稀释度为10–8时，取样量为0.1毫升/皿，同一稀释度中3个平板上的噬菌斑平均值为154个，则该样品的效价为： 154/0.1×10–8＝1.54×1011/mL 即每毫升病毒悬液中有1.54×1011感染单位的病毒。 (一)、细胞培养 1、原代细胞培养 2、二倍体细胞株 3、传代细胞系 (二)、鸡胚培养 方便、经济。但不是每种病毒都适合于在鸡胚中增殖。 (三)、动物接种 现已很少采用，但还用于研究病理机制。 二、病毒的培养 （1）、细胞病变 （2）、红细胞吸附 有些病毒感染细胞后，使细胞膜获得了能吸附红细胞的能力，这一现象称为红细胞吸附