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分子标记与育种 湖南农业大学园艺园林学院 蔬菜专业 阮先乐 生物技术的发展给植物遗传育种研究提供了新的手段,分子标记作为一种基本的遗传分析手段,是继形态标记、细胞标记和生化标记之后发展起来的一种新的较为理想的遗传标记形式。 形态标记简单直观,长期以来作物种质资源鉴定及与育种材料的选择通常都是根据形态标记来进行的。但是它数量少、多态性差、易受环境条件影响。 细胞标记主要是染色体核型(染色体数目、大小、随体、着丝点位置等)和带型(C带、N带 、G带等),显然,这类标记的数目也很有限。 生化标记主要包括同工酶和贮藏蛋白,具有经济方便的优点,但其标记数有限,不能满足种质资源鉴定和育种工作的需要。 分子标记技术则是通过遗传物质DNA序列的差异来进行标记,具有以下优点: ①直接以DNA的形式表现,在植物的各个组织、各发育时期均可检测到 ,不受季节、环境的影响,不存在表达与否的问题;②数量极多,遍及整个基因组;③多态性高,自然存在着许多等位变异,不需专门创造特殊的遗传材料;④不影响目标性状的表达;⑤ 许多分子标记能够鉴别出纯合基因型与杂合基因型,提供完整的遗传信息。 分子标记可广泛应用于育种研究,故有人称之为分子辅助育种或分子育种。下面就目前分子标记在园艺植物育种中几个方面的应用介绍如下: 一. 构建遗传图谱 遗传图谱是植物遗传育种及分子克隆等许多应用研究的理论依据和基础,分子标记可提供大量的遗传标记,而且可显著提高构建遗传图谱的效率。为园艺植物品种资源的研究,育种中亲本材料的选择选配、育种方案的制定提供了依据以及为基因定位、物理图谱的构建、基因克隆等奠定了基础。 二.分析亲缘关系 分子标记为品种资源的鉴定与保存、探究作物的起源与发展进化、远缘杂交亲本的选配、预测杂种优势等提供了理论依据。M.W.Bonierbale等(1988)通过RFLP分析,发现所有番茄RFLP标记能与马铃薯DNA杂交,且它们RFLP标记的连锁群也一致;在染色体RFLP标记排列顺序上,9条染色体相同,而有所不同的3条染色体是由于臂内到位所致,从而确证了这两个属起源于较近的共同祖先。 三.定位农艺性状 S.M.Kinyer等(1990)通过RFLP分析确定了一些参与番茄果实熟性的cDNA探针的染色体位置,其中编码多聚半乳糖酸酶的TOM6被定位在第10染色体,这为熟性育种的选择提供了标记。通过RFLP还确定了莴苣抗霜霉病基因、番茄抗烟草花叶病毒基因。 四.分子标记辅助选择 传统的选择方法是根据表现型直接选择。它易受环境条件等因素的影响。 通过分子标记可以进行间接选择,它的优点:①可进行早期选择;②可区别较细微的差异;③可同时对几个性状进行选择。 利用分子标记辅助选择,首先要将目的基因进行精细定位。目的基因和标记的遗传距离不大于10cM,然后,以标记的基因辅助选择。 五.种质资源及杂种后代的鉴定 应用分子标记可有效地鉴别栽培品种,消除同物异名的现象,确定保护种质资源遗传完整性的最小繁种群体和最小保种量,进行核心种质筛选和种质资源的分类等。D.L.Mulcahy等(1993)仅用一个RAPD引物就将8个苹果品种区别开来,Weising(1992)发现微卫星DNA是一个多态性高、稳定性好的探针,用该探针可以检测出15个栽培番茄的差异。 Thanks! 2006.4.3 * * *
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