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第一章 蛋白质的结构与功能Structure and Function of Protein 陈耕夫 生物化学与分子生物学系 基础学院139.com 主要内容 一、蛋白质的分子组成——氨基酸与多肽 二、蛋白质的分子结构 三、蛋白质结构与功能的关系 四、蛋白质的理化性质 五、蛋白质的分离、纯化 一、蛋白质的分子组成——氨基酸与多肽 (一)蛋白质的元素组成 1. 蛋白质的元素组成 主要元素:碳、氢、氧、氮 其他元素:磷、铁、铜、锌、锰、钴、碘 ,等等 2. 蛋白质元素组成的特点 各种蛋白质的含氮量很接近,平均值为16%。 凯氏定氮法测定蛋白质含量 实验方法 蛋白质含量测定方法 计算方法 100克样品中蛋白质的含量 (g %) = 每克样品含氮克数× 6.25×100 一、蛋白质的分子组成——氨基酸与多肽 (二)组成蛋白质的基本单位 —— L-?-氨基酸 二、蛋白质的分子组成 (二)组成蛋白质的基本单位 —— L-?-氨基酸 二、蛋白质的分子组成 (二)组成蛋白质的基本单位 —— L-?-氨基酸 一、蛋白质的分子组成——氨基酸与多肽 (二)组成蛋白质的基本单位 —— L-?-氨基酸 氨基酸的分类 氨基酸的分类方法很多,比较常用的是根据氨基酸侧链结构和理化性质进行分类: 非极性脂肪族氨基酸 极性中性氨基酸 芳香族氨基酸:苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸 酸性氨基酸:谷氨酸、天冬氨酸 碱性氨基酸:赖氨酸、精氨酸、组氨酸 极性中性氨基酸:侧链有不带电荷的极性基团 稀有氨基酸 某些蛋白质中含有一些不常见的氨基酸,它们是基本氨基酸在蛋白质合成以后经羟化、羧化、甲基化等修饰衍生而来的,也叫稀有氨基酸或特殊氨基酸。 半胱氨酸与胱氨酸 牛核糖核酸酶 氨基酸重要的理化性质 1. 两性解离性 氨基酸重要的理化性质 1. 两性解离性 氨基酸是两性电解质,其解离程度取决于所处溶液的酸碱度。 在某一pH的溶液中,氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等,成为兼性离子,呈电中性。此时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点(isoelectric point, pI) 。 氨基酸重要的理化性质 2. 紫外吸收性质 含苯环的氨基酸(主要是色氨酸、酪氨酸)在280nm有最大紫外吸收峰。故测定蛋白质280nm的光吸收值,是分析溶液蛋白质含量的快速而简便的方法。 氨基酸重要的理化性质 3. 氨基酸茚三酮显色反应 氨基酸 + 茚三酮 ?? 加热后显蓝紫色 该反应常用于氨基酸定性或定量测定。 一、蛋白质的分子组成——氨基酸与多肽 (三)蛋白质是由许多氨基酸残基组成的多肽链 1. 氨基酸的连接方式——肽键 氨基酸的连接方式 氨基酸的连接方式 氨基酸的连接方式 多肽链( polypeptide chain) 多肽链是指许多氨基酸之间以肽键连接而成的一种结构。 一、蛋白质的分子组成——氨基酸与多肽 (三)蛋白质是由许多氨基酸残基组成的多肽链 1. 氨基酸的连接方式——肽键 肽键 由一个氨基酸的?-羧基与另一个氨基酸的?-氨基脱水缩合而形成的化学键称为肽键(peptide bond),肽键化学本质是一个酰胺键。 肽 氨基酸通过肽键缩合而形成的化合物称为肽(peptide)。两分子氨基酸缩合形成二肽,三分子氨基酸缩合则形成三肽,以此类推。 寡肽 由十个以内氨基酸缩合形成的肽。 一、蛋白质的分子组成——氨基酸与多肽 (三)蛋白质是由许多氨基酸残基组成的多肽链 1. 氨基酸的连接方式——肽键 多肽 由十个以上的氨基酸相连形成的肽称多肽(polypeptide)。 蛋白质 多肽分子大到一定程度称为蛋白质。 氨基酸残基 肽链中的氨基酸分子因为脱水缩合而基团不全,被称为氨基酸残基(residue)。 一、蛋白质的分子组成——氨基酸与多肽 (三)蛋白质是由许多氨基酸残基组成的多肽链 1. 氨基酸的连接方式——肽键 氨基末端 多肽链中有游离α-氨基的一端,又称为N-末端。 羧基末端 多肽链中有游离α-羧基的一端,又称为C-末端。 牛核糖核酸酶 一、蛋白质的分子组成——氨基酸与多肽 (三)蛋白质是由许多氨基酸残基组成的多肽链 2. 一些重要的多肽 (1)谷胱甘肽(GSH) 一、蛋白质的分子组成——氨基酸与多肽 (三)蛋白质是由许多氨基酸残基组成的多肽链 2. 一些重要的多肽 (2)多肽类激素及神经肽 甜味素(又称阿斯巴甜,aspartame) 主要内容 一、蛋白质的分子组成——氨基酸与多肽 二、蛋白质的分子结构 三、蛋白质结构与功能的关系 四、蛋白质的理化性质 五、蛋白质分离
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