8-1功能基因组学.pptVIP

质谱技术的基本原理： 样品分子离子化后，根据不同离子间质核比（m/z）的差异来分离并确定分子量。 质谱仪组成： 进样装置、离子化源、质量分析器、离子检测器和数据分析系统组成。 质谱技术在蛋白组研究中的应用： A 肽质谱和肽序列分析 蛋白质经双向电泳后，分离到的蛋白质被切割下来，进行胶内酶解，或转移到PVDF膜上，进行膜上膜解，然后上样进行测序。 但目前质谱法还不能够取代Edman降解法测序，可是其测定速度较快。 B 鉴定翻译后修饰的蛋白质 质谱可通过特征离子监测的方法很快确定磷酸化肽，通过串联质谱确定磷酸化位点； 质谱可与蛋白酶解和糖苷酶酶解结合，寻找糖肽，鉴定糖基化位点； 质谱还参与糖链组成、结构甚至分支情况等的分析。 C 质谱技术的其他作用 质谱可对蛋白质二硫键进行定量和定位，分析蛋白质与蛋白质的相互作用，蛋白质与其他分子的相互作用，以及蛋白质的二级结构等。 差异显示 差异显示逆转录PCR法（DDRT-PCR) RNA指纹法 RNA Fingerprinting 基因组表达及调控的研究 在全细胞的水平，识别所有基因组表达产物： mRNA： c DNA 阵列 蛋白质：二维电泳 、质谱 研究生物大分子相互作用： 阐明基因组表达在发育