微生物第八章2(免费阅读).pptVIP

第二节 原核基因的表达调控机制 8.2.1 基因表达的转录起始调控 需要始终维持一定水平的持家蛋白编码基因，表达不受调控，称为组成型表达（constitutive expression）； 大多数原核基因的表达都受到严格调控，以适应胞内外环境条件的变化，保证生命活动的有序进行； 转录起始调控：是最常见的基因表达调控方式，通过调节蛋白与调控元件结合，提高转录起始复合物的形成效率（激活、正控），或者降低转录起始复合物的形成效率（阻遏、负控），而实现调控； 转录起始水平的正控激活调节模式 激活：当激活物存在时，与调节蛋白形成复合物，然后与调控元件结合，促进转录起始复合物的形成； 转录起始水平的负控诱导调控模式 诱导：当有诱导物存在时，诱导调节蛋白与调控元件解离，而解除对转录起始复合物的形成阻遏； 基因表达的负控诱导调控模式 当无诱导物存在时，阻遏蛋白与调控元件（操纵区）结合，阻遏RNA聚合酶的转录； 当有诱导物存在时，阻遏蛋白优先与诱导物结合，而从操纵区上解离下来，基因得以表达； 转录起始水平调控的负控阻遏模式 阻遏：当有辅阻遏物存在时，与阻遏蛋白形成复合物后，再与调节元件结合，阻遏基因的表达； 基因表达的负控阻遏调控模式 当无辅阻遏物存在时，阻遏蛋白不与操纵区结合，基因正常表达； 当有辅阻遏物存在时，阻遏蛋白与辅阻遏物结合后活化，再与操纵区结合，阻遏基因的表达； 调节蛋白和顺式作用元件 调节蛋白：能够与基因的调控元件结合，影响基因表达效率的蛋白质；因可以作用于不在同一条染色体上的基因，也称反式作用因子（trans-acting factor ）； 顺式作用元件（cis-acting element ）：基因调控元件的早期称谓；因为只对其在其中的基因发生效应； 调节蛋白的两种类型： 阻遏蛋白：与调控元件结合后抑制基因表达； 激活蛋白：与调控元件结合后提高基因表达水平； 调节蛋白的结构特点 调节蛋白一般都有两个功能区：DNA结合域（DBD）和效应物结合域，分别位于蛋白的C端和N端； 根据调节蛋白结构特点和氨基酸序列的保守性而划分为不同的调节蛋白家族； 调节蛋白的效应物 效应物（effector ）：能够与调节蛋白结合，而影响其与调控元件结合的小分子有机物或小分子蛋白； 效应物的类型： 诱导物：与阻遏蛋白结合后，降低阻遏蛋白与调控元件的亲和力，促进基因表达； 辅阻遏物：与阻遏蛋白结合后，提高阻遏蛋白与调控元件的亲和力，阻遏基因表达； 激活物：与激活蛋白结合后，提高激活蛋白与调控元件的亲和力，促进基因表达； 7.4.2 基因表达的转录终止调控 转录起始后，首先合成的mRNA 5’端非编码区形成的二级结构（终止结构、抗终止结构），可以决定转录的暂停、终止和继续延伸； 转录终止调控（transcription termination）：通过调节蛋白、或小RNA、或代谢中间物与mRNA 5’端非编码区的RNA元件结合，调控其二级结构的形态，而实现对转录效率的控制，影响基因表达的效率，也称转录弱化（transcription attenuation）； 终止结构与抗终止结构 新合成的mRNA 5’端非编码区，可以在紧随RNA聚合酶的后面形成类似终止子的二级结构（茎环结构），使RNA聚合酶-DNA复合物解离，转录终止；反之，则为抗终止结构，转录可以继续延伸； B. subtilis 色氨酸操纵子表达的转录终止调控 调节蛋白为：trp RNA-binding attenuation protein （TRAP） 核糖开关调控 核糖开关调控（Riboswitch gene regulation）：小分子代谢物直接作用于mRNA 5’端非编码区内的受体（RNA元件），通过改变其二级结构，而决定转录的终止或延伸； 8.2.3 E. coli 乳糖操纵子的表达调控机制 大肠杆菌乳糖代谢的调控现象： 环境中不存在乳糖时，细胞不表达与乳糖代谢相关的酶； 当环境中只有乳糖这一种碳源时，细胞表达相关的酶，能够吸收和利用乳糖； 当环境中葡萄糖和乳糖共同存在时，细胞也不吸收、利用乳糖，而是优先吸收、利用葡萄糖；当葡萄糖耗尽时，才开始吸收、利用乳糖； E. coli 乳糖操纵子的结构 乳糖操纵子（lac operon）：大肠杆菌与乳糖代谢相关的三个酶的编码基因构成的一个操纵子； lacZ gene ：编码b-半乳糖苷酶（ LacZ ）； lacY gene：编码乳糖专一性运输蛋白（LacY）； lacA gene：编码半乳糖苷转乙酰基酶（LacA） 紧邻lac 操纵子上游的是阻遏蛋白编码基因（ lac I） 乳糖操纵子的启动子和调控元件 乳糖操纵子阻遏蛋白的调控元件（lacO）位于+1~+21，是一段反相互补对称序列； 乳糖操纵子表达的负控机制 当缺乏乳糖时， Lac