第六章染色体工程..ppt

什么是染色体工程？ 染色体工程（chromosome engineering）是人们按照一定的设计，有计划地消减、添加或代换同种或异种染色体，从而达到定向改变遗传特性和选育新品种的一种技术。 染色体显带： 染色体显带：经不同的方法处理染色体，经染色后使染色体在纵轴上显示明、暗或着色深、浅相间的横纹即显带（Banding）。 这种带对每一条染色体来说都是独特的，可以区分和确认每一条染色体。 染色体畸变（chromosome aberration） 在某些内部或外界因素的影响下，染色体数目和结构可能发生改变，这种改变称为染色体畸变。 整倍体异常（euploid） 细胞内整个染色体组数目的增加或减少，形成整倍性的改变。 ① 单倍体（n）：见于正常成熟配子（精子和卵子） ② 多倍体（n≥3n）：见于自然流产的胎儿中，是人类自然流产的重要原因。 非整倍体异常 指体细胞中个别染色体数目增加或减少了一条或几条，为最常见的染色体异常。 ① 亚二倍体: 在2n基础上减少一条或数条染色体。（单体型2n-1） ② 超二倍体: 比二倍体（2n）多一条或数条染色体。（三体型2n+1或多体型2n+n） （二）染色体结构畸变(construct abnormality) 染色体结构畸变：指染色体部分片段的缺失、重复或重排。实质上是指染色体上遗传物质的增减或位置改变。 染色体结构畸变的根本原因：染色体断裂（breakage）及断裂后的重排。 染色体结构畸变的类型 缺失（deletion，del） 重复（duplication，dup） 倒位（inversion，inv） 易位（translocation，t） 什么是染色体工程？ 染色体工程（chromosome engineering）是人们按照一定的设计，有计划地消减、添加或代换同种或异种染色体，从而达到定向改变遗传特性和选育新品种的一种技术。 物理学方法 温度休克法：冷休克法（0～5度）和热休克法（30度左右）。 定义：用略高于或略低于致死温度的冷或热休克来诱导三倍体或四倍体的方法。 关键：能否成功地阻止第二次成熟分裂或第二极体的排出。要达到这一点，必须考虑温度处理的开始时间（TA）、处理持续时间（D）和处理温度（T）这三个因素。 目前对鱼类使用温度休克法诱导三倍体的工作报道较多。一般来说，冷水性鱼类如鲑科种类应用热休克法、而温水性鱼类用冷休克效果较好。 优点：廉价、易操作，是诱导动物细胞多倍体化的常用手段，也有利于大规模生产使用。 物理学方法 水静压法：采用较高的水静压（65kg/cm2）来抑制第二极体的放出或第一次卵裂产生多倍体。 这种方法诱导率高（一般在90％～100％）、处理时间（3～5min）短，对受精卵损伤小、成活率高。 但是，该法需要专门的设备——水压机，成本较高，其样品室容量有限，处理卵的量有限，所以不适于大规模生产的。 化学方法 有些化学物质也可以用来阻止第二极体的排出或受精卵的有丝分裂而产生三倍体或四倍体。 细胞松弛素B能抑制肌动蛋白聚合微丝，从而抑制细胞质分裂。 秋水仙碱可以抑制细胞分裂中纺锤丝的形成，因而抑制有丝分裂，这在植物中已经广泛应用。 其它药物还有麻醉剂，如N2O、CHClF2和聚乙二醇等。 缺点：化学药品一般比较昂贵、且具有毒性，影响处理后的胚胎发育，同时加上化学药物诱导产生的多倍体往往是在育种上没有价值的镶嵌体，所以化学方法在实际中的应用不及物理方法。 鉴定方法 核体积测量：间接法 测量红血球来鉴定：间接法 蛋白质电泳鉴定：间接法 染色体计数是鉴定多倍体倍性：直接法 另外，利用血液成分、酶的含量等进行生化分析也可以鉴定多倍体。 采用何种方法均有利有弊，进行鉴定主要依赖于所测样本的发育时期、实验要求和所具备的仪器设备条件。 主要方法介绍 核体积测量属于间接法。 一般，细胞核大小与染色体数目成比例增加，而且为维持恒定的核质比例，随着细胞核的增大，细胞大小也按比例增加。因此组成多倍体有机体的细胞及细胞核通常要比二倍体大一些。但多倍体的器官或身体并不一定都比二倍体大。 主要方法介绍 在鱼类，通常通过测量红血球来鉴定多倍体倍性，其中核体积之比最为常用，也有用核面积甚至单独用核长X或短X之比来表示的。蛋白质电泳也可以用来鉴定多倍体倍性，属于间接法，但在鉴定时要慎用。 利用血清蛋白质电泳图差异来辨别二倍体和三倍体卵胎生帆锵，但不能用来分辨关东银鲫。 染色体计数是鉴定多倍体倍性的一个准确的直接方法，但比较费时。质量好的染色体标本可以从胚胎获得，因为胚胎细胞分裂指数高。 流式细胞仪测定DNA含量是较准确的方法 优点和缺点 多倍体育种技术方法简单、见效快，具有潜在的理论和应用价值。 许多诱导的多倍体动物如两栖类、鱼类、贝类等却