第十一章抗体酶..pptVIP

第十一章 抗体酶（Abzyme) 抗体酶的概念 抗体酶的催化特征 作用机理 抗体酶的制备 抗体酶的催化反应 抗体酶的应用 当人体（以及其它高等动物）受到外来抗原的刺激时，其免疫系统会根据抗原的特点（抗原表面决定簇）产生特定抗体。一般来说，一种抗原可以刺激产生10-8种抗体，并且所产生的抗原均具备极高的特异性，即与抗原强烈结合。 酶的催化机制 过渡态理论假说 酶催化的实质：能特异性结合并稳定化学反应的 过渡态(底物激态)，从而降低反应能级。酶通过某种 方式与高能、短寿命的过渡态结合而起催化作用。这 个过渡态构型中某些键在形成，另一些键在断裂，存 在时间极短，半衰期约为10 ~10 s，实际中极难捕获。 过渡态分子难以捕获，而过渡态类似物是能够模拟一个酶催化反应过渡态的结构的稳定物质，于是设想，只要寻找到与反应中决定性步骤的相应酶紧密结合的酶竞争性抑制剂，就等于发现了过渡态类似物； 1984年Lerner进一步推测：以过渡态类似物作为半抗原，则其诱发出的抗体即与该类似物有着互补的构象，这种抗体与底物结合后，即可诱导底物进入过渡态构象，从而引起催化作用。 根据这个猜想Lerner和P．C．Schultz分别领导各自的研究小组独立地证明了：针对羧酸酯水解的过渡态类似物产生的抗体，能催化相应的羧酸酯和碳酸酯的水解反应。1986年美国《Science》杂志同时发表了他们的发现，并将这类具有催化能力的免疫球蛋白称为抗体酶（abzyme）或催化抗体（catalyticantibody）。 抗体酶又称催化抗体（catalytic antibody） 一种新型人工酶制剂，是一种具有催化功能的抗体 分子。是抗体的高度选择性和酶的高效催化能力巧妙 结合的产物，本质上是一类具有催化活力的免疫球蛋 白，在其可变区赋予了酶的属性。 本质：是对抗原(antigen) 作出应答的产物，这种抗 原分子被有目的地改造成某种反应的转换态中间物。 四、抗体酶的制备 抗体向酶转变的关键：抗原能诱导已具有酶活性的抗体； 使抗体具有酶的结构，就必须在抗原的结构上进行改造； 利用某一反应过渡态的模拟物作为抗原，则可得到催化该反应的抗体。 抗体设计的原则就是酶的催化机制，故免疫学原理以及过渡态理论是抗体酶设计的主要依据。 制备抗体酶的关键在于设计半抗原，只有这种特定的抗原才能诱导具有酶样结构与功能的抗体。 制备抗体酶的常用方法—单克隆抗体技术 五、 抗体酶的催化反应 1．酰基转移反应 2、重排反应 3、氧化还原反应 4、金属螯和合反应 5、磷酸酯水解反应 6、磷酸酯闭环反应 7、光诱导反应 a.光聚合反应（二聚作用） b.光裂解反应 七、研究展望 1、研究酶作用机理，获得蛋白质结构与功能间关系的一般规律。 2、获得一类新型的蛋白酶。 3、催化天然酶不能催化的反应。 * * 生物催化剂 （Biocatalyst） 蛋白质类：天然酶 enzyme 极端酶 extremozyme 抗体酶 abzyme 生物工程酶 其它：模拟酶 核酸类: 克隆酶 遗传修饰酶 蛋白质工程新酶 、 Ribozyme Deoxyribozyme 什么是抗体？ 什么是酶？ 抗体与酶的异同： 相同点：都是蛋白质，都有特异性。 不同点： 1）抗体无催化活力，酶有催化活力。 2）本质差别：酶是能与反应过渡态选择结合的催化物质，抗体是和基态紧密结合的物质。 3）酶的活性和合成受到代谢调节，种类有限。 抗体只有在抗原存在时才产生，种类无限。 这种类似物也能根据化学反应机制推测设计出来。然后，以过渡态类似物为半抗原，利用哺乳动物的免疫系统，诱导与其互补构象的抗体产生，这种抗体即具有催化活性；Kohler和Milstein于1975年发明了单克隆技术，使抗体酶的生产成为可能。 一、概念 二、抗体酶的催化特征 1、与天然酶相比抗体酶的特点 能催化一些天然酶不能催化的反应 有更强的专一性和稳定性 催化作用机制不同 2、抗体酶和非催化性抗体作用的比较 更高的反应特异性 反应的可逆性 反应的量效性 反应过程 酶与底物形成过渡态理论 酶的催化在于能结合底物产生过渡态，降低能障（反应的活化能）。 以过渡态类似物作为半抗原，诱导与其互补构象的抗体，使其具有催化活性，可观察到抗体催化相应底物发生化学反应。 三、抗体酶的催化作用机理 原 则 1. 诱导法（细胞融合法） 用设计好的半抗原，通过