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- 2016-12-20 发布于重庆
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第一章 PCR1 PCR的英文全称是什么? Polymerase Chain Reaction2 PCR是谁发明的?Kary Mullis3 PCR的基本原理是什么?
PCR的基本工作原理是以拟扩增的DNA片段为模板,以一对分别与模板DNA互补的寡核苷酸为引物,在DNA聚合酶的作用下,根据半保留复制的机制沿着模板DNA链延伸,直至新的DNA合成。不断重复这一过程,则可使目的DNA片段得到扩增。
4 PCR反应的产物中一般会生成几种长度不同的产物?反应结束时他们的含量分别是怎样的?
PCR反应中一般会产生2种不同长度的产物:一种是预期长度的产物,一种是比预期长度长得多的产物;前者以指数级数增加(2n),后者以几何级数增加(2n)。因此后者在总产物中所占比重很小,可忽略不计。
5 一般PCR反应中包括几种基本成份?它们的功能分别是什么?
模板:待扩增的DNA或RNA;引物:与靶DNA的3’端和5’端特异性结合的寡核苷酸片段,是决定PCR特异性的关键。只有每条引物都与靶DNA特异性结合,才能保证其特异性,引物越长,特异性越高。两段引物间的距离决定了扩增片断的长度;两引物的5’端决定了扩增产物的5’端位置。说明引物决定了扩增片断的长度、位置和结果。’-OH末端,b.3’-5’外切酶活性,校正功能,c.5’-3’外切酶活性,切除错配核苷酸;
石蜡油:维持恒热和整个体系中盐浓度,减少PC
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