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酶的概念及其化学性质 酶的作用特点 酶的组成与分类 酶的国际分类与命名 酶的作用机理 酶活力及其测定 影响酶促反应速度的因素 酶活性的调节控制与调节酶 维生素与辅酶 酶的分离纯化 酶工程简介 1、酶具有高效催化性 V酶比V无高108-1020倍，比V非酶高107-1013倍。 2、酶具有高度专一性 （1）绝对专一性 （2）相对专一性 （3）立体专一性 3、酶的活性是受严格控制的 按化学组成分： 单纯蛋白酶:指生物活性仅决定于蛋白质部分。 结合蛋白酶:由蛋白质和非蛋白质部分组成的酶。 非蛋白部分一般是有机小分子化合物或金属离子，称为辅因子。辅因子又可分为辅酶和辅基，二者无本质区别。 根据酶分子的结构特点： 单体酶：仅有一条多肽链组成的酶。 寡聚酶：有几个甚至几十个亚基组成的酶。 多酶复合体：由功能相关的一组酶在空间相互嵌合的复合体。 1、酶的命名 2、酶的分类 1.酶的催化作用与分子活化能 2.中间产物学说 设一反应： S （底物） P（产物） （1）反应过程 （2）能量变化 3.酶的活性部位和必需基团 木瓜蛋白酶活性中心氨基酸残基 4.诱导契合学说 （1）锁钥学说 1890年，Emil Fischer提出。优点，缺点。 （2）诱导契合学说 1958年，D.E.Koshland提出。 5.使酶具有高效催化效率的因素 6.酶原激活 1、酶活力及酶活力单位 2、酶的比活力 也就是酶含量的大小，即每克酶蛋白所具有的酶活力，一般用单位/毫克蛋白（u/mg蛋白质）表示。有时也用每克酶制剂或每毫升酶制剂含有多少个活力单位表示。 1、底物浓度对酶促反应速度的影响 （1）[S] 与V关系曲线 （2）米氏方程 （3）Km值的意义 （4） Km值的求法 2、PH对酶促反应速度的影响 （1）PH与V关系曲线 （2）最适PH （3）PH影响酶活力的因素: 3、温度对酶促反应速度的影响 （1）温度与V关系曲线 （2）最适温度 （3）温度影响酶活力的因素 4、激活剂对酶促反应速度的影响 激活剂：凡是能提高酶活性的物质。 可分为二类： （1）无机离子：a:金属离子；b:阴离子；c:氢离子 （2）中等大小的有机分子：抗坏血酸、半胱氨酸、谷氨酸；乙二胺四乙酸（EDTA)。 5.抑制剂对酶促反应速度的影响 抑制剂可分为两大类：不可逆抑制剂和可逆抑制剂 （1）不可逆抑制剂 抑制剂与酶的结合是一不可逆反应，不能用透析等方法除去抑制剂。 举例：二异丙基氟磷酸(DIFP)；有机磷杀虫剂（1605，敌百虫）；碘乙酸，碘乙酰胺等。 （2）可逆的抑制作用 抑制剂与酶的结合为一可逆反应，可以用透析等方法除去抑制剂。 分为两种主要类型： 竞争性抑制作用 非竞争性抑制作用 别构酶调控： 1.别构酶：具有别构效应的调节酶，一般是由两个或两个以上亚基构成的寡聚酶，有别构中心和活性中心两个中心。 2.别构效应：当代谢调节物结合在别构中心上时，引起构象的改变，使酶活性中心对底物的结合与催化作用受到影响，从而影响调节酶的反应速度及代谢过程。 3.调节物： 4.正协同效应：调节物结合使酶活性升高的效应。 负协同效应：调节物结合使酶活性降低的效应。 5.别构酶动力学曲线不符合米氏方程，是S型曲线。 S型曲线对酶促反应速度的调节是十分有利的。 同工酶调节 同工酶：能催化相同的化学反应，但酶的分子结构与理化性质不完全相同的一组酶。 维生素B1和羧化辅酶 维生素B2和黄素辅酶 泛酸和辅酶A 维生素PP和辅酶I、辅酶II 维生素B6和磷酸吡哆醛 生物素 叶酸和叶酸辅酶 维生素B12和B12辅酶 硫辛酸 化学酶工程：也称初级酶工程，主要是通过化学修饰、固定化处理、甚至通过化学合成等手段，改善酶的性质以提高催化效率及降低成本。它包括自然酶、化学修饰酶、固定化酶及化学人工酶的研究和应用。 化学修饰酶:对纯酶进行化学修饰以改善性能。常用于酶学研究和临床医学。 固定化酶：指被结合到特定的支持物上并能发