猪抗原抗体检测方案.pptVIP

辰丰生物 检测的目的 1．疾病预警 （1）了解疾病在场内的污染状况，制定相应策略 （2）提前了解免疫抗体的高低及整齐度，及时纠正 2．免疫程序的评估与优化 （1）了解母源抗体的消长情况 （2）疫苗接种的效果-----免疫抗体监控 3．疾病控制和清除计划：通过系统检测和措施，实施疾病的控制或清除计划 4．疾病诊断 重点进行监测四大猪病：猪瘟、蓝耳、伪狂犬、圆环 1. 猪瘟主要问题 （1）抗体水平偏低 （2）疫苗的选择及剂量：细胞苗？脾淋苗？，150 RID = 37 PD50 （3）持续性感染猪的存在 猪瘟抗原检测 （1）常用方法：PCR、荧光抗体和ELISA （2）检测目的：引进种猪或后备母猪时的检查，疑似病例的确诊，猪群带毒率的定期评估 （3）结果分析：猪瘟抗原ELISA阳性结果代表野毒阳性，PCR和荧光抗体阳性结果有可能是疫苗毒的干扰。 猪瘟抗体ELISA检测要点: A.怎样评估母源抗体和免疫效果 1）当母源抗体的降到阻断率（Block）50%以下时，才能不干扰疫苗的免疫。（确定首免日龄） 2）免疫后阻断率（Block）上升到50%以上才能代表免疫合格。 良好的种猪场要求：阳性率100%（40），合格率90%（50） cv25%） CSFV判定标准:若%PC值大于或等于0.4则判定阳性；若PC%值小于0.4则判定阴性 表1：猪血清CSFV抗体检测结果 CSFV判定标准:若%PC值大于或等于0.4则判定阳性；若PC%值小于0.4则判定阴性 B. 剔除持续感染猪或无抗体反应猪 1）持续性感染的种猪可间断性或持续性排出病毒，他们成为整个猪群的感染源。 2）首次使用应对母猪群进行检测，对抗体低下猪只进行补针后6周复检。若仍然没有抗体产生，应进行淘汰。 C. 猪瘟抗体检测结果分析 1）Cutoff值是 1：16代表抗体阳性 2）实际生产中至少要在1：64以上才有一定的保护，经产母猪多次疫苗免疫后抗体水平一般会在1：256到1：1024左右波动。 D. 猪瘟抗体 ELISA检测时间表 品项 种类 时间 目的 取样数量 日常评估 后备母猪 在配种前 野毒感染和抗体水平 全部 经产母猪 3个月一次个月一次 评估母猪群的健康状态和抵抗力 20 商品猪 二免后4-6周4-6周 监控免疫效果 20 首免日龄 仔猪 21日龄日龄 评估母源抗体衰减水平，选择最佳首免时间 15 28日龄日龄 15 35日龄日龄 15 42日龄日龄 15 蓝耳病的主要问题 （1）毒株的变异与交叉保护 （2）疫苗的选择：灭活疫苗、弱毒疫苗、毒株 （3）猪群稳定性评估 蓝耳病的检测方法 （1）抗原：RT-PCR （2）抗体：ELISA 蓝耳病的抗体检测结果分析 （1）对于稳定的种猪群，S/P值为0-2左右，很少大于2.5. （2）良好免疫群的典型的S/P比值范围为：0.7 to 1.8 ；有些可能2.0 。 （3）如果每年免疫两次，仍有多于20％的猪抗体为阴性，需要对疫苗的管理和使用进行检查。 （4）当S/P 2.5 – 病毒血症 （5）当S/P 3.5-高于5.0 – 急性感染 蓝耳病的抗体检测结果分析 （6）6-7周龄时，多数仔猪抗体可变为阴性（无病毒循环） （7）引进种猪，要剔出阳性值SP1.2的猪只，保证种群的稳定 （8）公猪抗体阳性值SP2.5的最好不要使用 （9）母猪群间隔1-2个月对群体进行监控，了解猪群等稳定状态 （10）仔猪了解病毒的感染时间，加强药物保健 （11）当S/P 2.5时，猪群即呈现不稳定状态，需要采取措施进行控制 PRRSV判定标准:S/P值大于等于0.4判定为阳性；S/P值小于0.4判定为阴性 蓝耳病抗体检测时间表 品项 种类 时间 目的 取样数量 日常评估 后备母猪 在配种前 防止引入不稳定猪只 全部 经产母猪 2个月一次个月一次 了解猪群稳定性 20 商品猪 3个月一次个月一次 监控免疫效果和稳定性 20 伪狂犬的主要问题 （1）种猪群野毒抗体（gE抗体）阳性率居高不下 （2）中大猪的呼吸道问题 （3）散发性母猪繁殖障碍 （4）净化方案的选择 伪狂犬的检测方法 （1）PRVgB：总抗体，S/N值和阻断率（BLOCK值） （2）PRVgE（I）：野毒抗体 （3）通过PRV-gB和PRV-gI抗体检测可了解本场伪狂犬病的流行状况，制定相应的免疫方案及措施。 伪狂犬清除计划 （1）在阳性率低的种猪群，建议一次性淘汰所有阳性种猪。每个季度筛选一次，加强疫苗免疫，同时保证引入阴性后备母猪和种公猪，一般一年见效。 （2）在阳性率很高的种猪群，保证引入阴性后备母猪和种公猪，加强免疫。每季度抽样监控野毒阳性比例防止感染扩大并用PRV-gB评估免疫抗体水平，三年可见效