第7章一般毒性作用及其实验与评鉴方法..docVIP

一般毒性作用及其试验与评价方法 一般毒性作用：是指毒物对动物机体产生的综合毒性效应，也称基本毒性作用根据接触毒物的时间长短可将产生的毒性作用分为急性毒性、亚慢性毒性和慢性毒性。 第一节 急性毒性作用及其试验与评价方法 一、急性毒性试验的概念 急性毒性试验是指动物机体一次或24h内多次接触受试物后在短期内所产牛的毒性效应及反应。 观察内容一般包括行为变化、外观改变以及致死效应。 观察时间一般为7d，观察范围可为7～28d（迟发毒性效应）。 凡经口或经注射给毒，“一次”的含义是指瞬间将受试物输入试验动物体内；若经呼吸或皮肤给毒，“一次”则指在一个特定的时间内，使试验动物持续接受受试物的过程。 “24h内多次接触受试物”的概念是指当受试物毒性很低，一次接触还不能达到充分了解该受试物的毒性作用，或一次不能导入设计剂量的受试物时，需在24h内分次染毒。 二、急性毒性试验的目的 （1）测定和计算出受试物的致死量及其他急性毒试参数，主要获得受试物对某种实验动物以某种接触途径的LD50值； (2)了解受试物对动物机体的急性毒性特征，靶器官和剂量一反应关系； (3)研究受试物在动物体内的动力学变化规律； (4)为下一步的亚慢性、慢性毒性试验及其他毒理学试验的剂量设计和观察指标选择提供依据。 三、急性毒性试验方法 1．实验动物的选择和要求 (1)品种、品系的选择 实验动物选择的原则是以哺乳动物为主，选择两种或两种以上的动物，包括啮齿类(rodentspecies)和非啮齿类(nonrodenl species)，其中至少有一种非啮齿类动物。啮齿类多选用小鼠和大鼠，非啮齿类常选用犬或猴。 (2)性别和年龄或体重的要求 对于实验动物的性别一般要求雌雄(早6)各半。如果试验仅为某些特殊试验研究目标，也可选用单一性别。如致畸试验可仅选雌性动物，对精子毒性试验可仅选雄性动物。 急性毒性试验通常要求刚成年的动物。 一般按体重选购，通常要求小鼠18～25g、大鼠180～240g、豚鼠．200～250g、家兔2～2．5kg、猫1．5～2kg、犬4～6kg(犬一般为1岁左右)。 同次试验小鼠体重相差不超过4g、大鼠体重相差不超过10g。一般来说，同一批次实验动物体重变异范围不应超过其平均体重的20％。 (3)实验动物数量与分组 急性毒性试验一般要求设5～7组，每组的实验动物数依实验动物种类而定。一般大、小鼠每组不少于10只，家兔每组不少于8只，犬等大动物每组不少于6只。分组时应严格按照随机化的原则。 (4)检疫和适应 质量控制(包括品种、品系、遗传和微生物背景)。购回的实验动物在试验前应有1～2周的检疫观察和适应期。 2．染毒方法 静脉注射吸人肌肉注射腹腔注射皮下注射经口皮内注射经皮。同一受试物不同染毒途径LD50。的大小通常也符合此规律。 (1)经口染毒 经口染毒常可采用灌胃、饲喂、吞咽胶囊等方式。各经口染毒方式各有优缺点，应视具体情况选用。 ①灌胃法：将受试物配成一定浓度的溶液或混悬液，经胃管或灌胃针一次导入胃内。 灌胃容量视实验动物大小而定。小鼠，一次0．2～1mL或0．1～0．5mL／10g体重；大鼠，一次不超过5mL／只，或0．5～1．OmL／l00g体重；家兔，不超过10mL／2kg体重；狗，不超过50mL／10kg体重。 染毒剂量、溶液浓度和灌胃体积之间可采取两种方式。一种方式为采用等体积不等浓度灌胃，另一种方式为采用等浓度不等体积灌胃。其关系可表示如下。 等体积不等浓度灌胃：随各组剂量增加，溶液浓度加大，灌胃体积不变。 等浓度不等体积灌胃：随各组剂量增加，溶液浓度不变，灌胃体积加大。 灌胃法的优点是染毒剂量准确；缺点是工作量大，操作要求谨慎，一旦灌胃误人气管，即可人为导致动物死亡。 ②饲喂法：将受试物拌入饲料或饮水中，让其自由摄入。需单笼饲养动物，每天结算摄食量或饮水量，来折算摄入受试物的剂量。 饲喂法的优点是简单易行，符合人类接触受试物的实际情况。 但也有许多缺点，一方面是动物对受试物的摄入量不够准确，与设计剂量之间的误差较大：另一方面是动物可能拒食有异味或适口性差的受试物，使摄人量减少，这样，染毒量就达不到设计剂量，同时影响动物的正常摄食和生长发育。此外，易挥发物、易水解、易氧化等受试物会因挥发或变质而损失。 ③吞咽胶囊法：将受试物装入胶囊内，强行放于动物舌后咽部，迫使动物咽下。此法常用于兔、猫、犬、猴等较大动物的染毒。 吞咽胶囊法的优点是剂量准确，尤其适用于易挥发，易水解、易氧化、有异味的受试物；缺点是经口投放胶囊时动物有咬伤人的危险。 需要注意的是：经口染毒前，实验动