L型Ca2+通道在帕金森病黑质多巴胺能神经元损伤中的作用研究.docVIP

青岛大学 硕士学位论文 L型Ca2+通道在帕金森病黑质多巴胺能神经元损伤中的作用研究 姓名：王荣 申请学位级别：硕士 专业：神经生物学 指导教师：谢俊霞  ????琍?是一种常见的中枢神经系统退行性疾病，以 肌强直、肢体震颤和运动减少等症状为主要临床表现。其主要病理特征为黑质致密 ?????????多巴胺?????珼?能神经元的脱失 通道在黑质多巴胺能神经元死亡中的作用，并进一步探讨其可能机制。实验结果如 ??煌?ǘ鹊?．????????／?处理??细胞? 有不同程度的下降?锄．?，与对照组相比?挥τ肅??ǖ雷瓒霞料醣降仄?? ?梢阅孀?．??对??细 ???疞??．???? 胞的损伤作用?螼．?，与?甇??鹕俗橄啾?。  出现由??辗⒌男?P形??????攵哉兆橄啾?，在? ? 单位??的表达量有增高趋势，但无统计学意义??????攵哉兆橄啾?：??? ? ?????ゲ嗨鸹俅笫驧???螅?鸹俨辔谱刺錎??棵飨越档?尸?．?， ??暇厶翘?票傅募毙蕴?涸刈榇笫蠛谥世野彼狒腔?????? 发病机理的研究提供了新的资料，并为?的药物治疗提供新的思路。 硕士研究生：王荣?窬??镅? 指导教师：谢俊霞教授  ?坶? ???? ?????? ??????疭 ?????疭 ??????? ?? ????? ?????? ????? ? ??? ????? ??? ? ???琽???????，?????? ?? ? ??????????甅??????????? ?? ?? ???????? ?????’?瑆?? ??? ? ??? ?? ? ??? ????? ??? ????? ?????? ????????瑃? ????????????瑀??? ????? ????? ? ??? ?????? ?瓺???? ??????? ? ??? ? ?? ?????????琧????灰瞭? ? ?????? ??????? ??? ??????? ???． ? ? ????．  ? ?甌???????猧??????? ????????????琧????蟤 ? ????? ???．? ?? ? ???? ? ????，??????????? ????? ????? ? ????????瑃? ??? ? ??? ???． ??? ??? ????瑃????? ????? ??? ? ????． ??????? ????? ????? ??? 俨?．?，???? ?? ???． ?甌? ?????? ???． ?甌??????? ? ??? ?????? ???????．?，???? ???． ? ?? ? ?? ??? ??—????? ??? ????????? ?????? ??? ???????? ?  ?????? ????????? ????；??；????； ?????  言 帕金森病??????????琍?是一种常见的与年龄相关的神经退行性疾病， 在?岁以上人群的发病率呈指数增高趋势。随着人类社会老龄化的加剧，?的发 主要是肌强直、肢体震颤和运动减少等症。?的主要病理特征为黑质致密带 ?????????多巴胺?????珼?能神经元的脱失及 功能失衡，从而导致了细胞内游离??浓度增高。进而引起的氧化应激最终可能导 能产生??，在细胞内铁水平存在的情况下，尤其是在??过多的情况下，通过  青岛大学硕．仁学位论文 究提供新的，进一步的资料。 ?  材料和方法 ??所用试剂 胎牛血清??? ??? ??常用仪器 普通台式离心机??．???、恒温水浴锅、超净工作台等均为国产仪器。 ????? ? ? ?丙酮酸钠、?? ???溶于?? ?，????拙段狾．?“?过滤灭菌，分装为? ???、??? ????????，?? ??嗝顾兀?疵顾卮⒋嬉海航??騏的青霉素溶于?? 于? ??溶液混匀，得到含青霉素和链霉素均为??／?的溶液， 滤菌后分装，于．?℃保存备用。 ?，胎牛血清??，青霉素／链霉素溶液 ??鹊鞍酌福?．? ?鹊鞍酌敢约癘．?? ?的微孔滤膜过滤除菌，．?℃保存备用。 进行细胞培养前，将??细胞自液氮中取出，?℃水浴至完全溶解后，离心。  ??所用试剂 ?：雷杜公司产品，中国。 ??液体配制 ???溶液：称取????．???疞??芙獾玫脚ǘ任? ?????芤海撼迫?．???的?籓???苡趌??浓度为???／?的?溶 ?? 活细胞琥珀酸脱氢酶的活性呈正相关，由于死细胞中不含琥珀酸脱氢酶，因此加入 ??换嵊蟹从ΑＫ?訫?与所测细胞共孵育一定时间后，形成蓝色甲瓒颗粒的 量可以反映细胞存活率。 取处于对数生长期的??细胞，胰蛋白酶消化后，吹打