RT1-E基因导入在防止慢性移植物血管病中的作用.docVIP

上海交通大学 博士后学位论文 RT1--E基因导入在防止慢性移植物血管病中的作用 姓名：罗明 申请学位级别：博士后 专业：@ 指导教师：邱建新 2010  建携带??瓻基因的腺病毒载体并转染供者腹主动脉内皮细胞，观察??籈基 因表达对移植后血管内皮增生的影响。根据移植物是否转染??瓻基因将受体 分为三组，空白对照组?只，无腺病毒转染，阴性对照组?只，转染空腺病毒 载体，实验组?只，转染携带??瓻基因的腺病毒载体，规定获取受体标本的 时间点为?天，?天和?天，每组每个时间点?只大鼠。所有受体术后? ?抑制急性排斥反应。 天内每天给与??．??／? 结论：?⒀∮媒?幌礚??大鼠和??大鼠建立腹主动脉原位移植模型，术后 关键词：动物模型；慢性移植物血管病；基因转染  ? ??????． ?????、??? ?????? ? ??????．?????? ??? ???瓹??? ????? ??? ????? ??? ??．?? ??????? ??????．?????? ? ? ???? ?????甌?????? ????? ?????甌? ??????????? ?? ? ?? ????? ???????甌? ??? ?? ? ?一??甌? ????? ?? ?? ?????????? ?一?????????一??????? ? ?籨? ??? ?? ???．??? ??????． ???籧??? ??????；????????  ?????????V饕1硐郑?抵市云鞴俚腃?的共同 ????? 主动脉直接移植到受者的腹主动脉上，从而通过对移植血管的预处理来观察其病 现抗原一抗体复合物、补体和抗内皮细胞抗体常见于内膜增厚和纤维素样坏死 区，因此在这些免疫损伤中，体液免疫显得非常重要；第二方面是急性排斥发应 ????????珹?对?的影响，大量的临床资料已经证明了既往的? 是众多影响因素中导致后期出现?的最重要的因素【?俊３?艘酝猓琀??等 发应的发生发展中也起到重要的作用。  ?????鹊难芯炕狗⑾諬?—?箍赏ü?赴?蜃?如干扰素、白介素和肿 展的作用【?】。总而言之，目前的研究已经发现??狦不仅可抑制急性排斥 载体作为有效的基因转移载体在实验中己被广泛利用，目前人们已构建出了删除 就是??土诮?陌?靶藕判蛄?，其安全性很高，免疫反应很少，可容纳较大 疗基因转至血友病动物的体细胞中，活性表达能持续数月。腺病毒作为载体不仅 能够转染分裂细胞，也可转染非分裂细胞【?，??１狙芯客ü鼳?作为载 体将??瓻基因转染到移植物血管的内皮细胞上，从而观察其对移植后慢性移 植物血管病发生发展的影响，为以后将??狦基因转移到移植物的血管内皮 细胞以防止慢性排斥反应的发生具有重要的应用价值。 参考文献： ?瓾?????琂??????????，??．????  ? ? ??；????． ????：?? ?? ?，????，??? ? ? ? ??????篊??? ???． ????狶?? ??????? ?????? ?甌??? ??? ??????????? ? ????．?：???? ?????? ??，?． ?????甀??? ?瓹?????．??琈???琍．，? ?．??狦 ??????? ? ??? ?? ?． ? ? ?????瓵?甁．??瓽?? ?，?? ????????? ?甉??琓?????，??? ???． ? ????? ????????；???? ?????．? ??瓹???? ?????? ?????。??? ? ?琈??? ?  ? ??????甅??? ????? ?琑?????甋????．???? ????????? ?  第一部分大鼠腹主动脉原位移植模型的建立 每天交替光照时间?小时，自由进食、水。 实验分组将实验随即分为空白对照组、阴性对照组和实验组 大鼠。 大鼠腹主动脉原位移植模型的建立 ??供体动脉的获取 脉注射???硌嗡?内含??嗡?。将供体固定于手术板上，腹部备皮，碘 伏和?％酒精依次消毒并铺巾，纵行切开腹壁，切口从剑突下至耻骨联合，进入 腹腔后再行大十字切?，充分显露腹腔。将肠管推向身体右侧用生理盐水纱布保 护，用棉签轻轻分离后腹膜，显露腹主动脉和分支。先分离、结扎双侧腰动、静 脉，用丝线提起腹主动脉，在左肾动脉平面以下切断腹主动脉，迅速游离至远端 髂血管分叉处并切断，获得供体血管约??．???，肝素生理盐水冲洗管腔，放 入??４嬉褐校?℃冷保存备用。  用棉签轻轻分离后腹膜，显露腹主动脉和分支。因下腔静脉紧贴腹主动脉，且静 脉壁菲薄，损伤后很难止血，需要仔细分离动、静脉间隙，遇见分支血管则分离 上下方粘连并结扎、切断，完全游离出肾血管以下