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影响直肠癌细胞增值的因素一细胞培养人结肠癌细胞系均购自并由上海消化外科研究所传代保存采用含胎牛血清的培养传代均使用含胎牛血清的培养液置于的培养箱中以至的比例传代培养二方法样本收集及免疫组化染色结肠直肠肿瘤标本取自上海市微创外科临床医学中心手术室手术标本切除后生理盐水清洗打开肠腔剔除瘤体表面坏死及炎性肉芽组织取肿瘤中心部位及距肿瘤以上的正常肠黏膜全层组织切成块状后置入样本管组织标本经甲醛溶液充分固定后制作蜡块切片贴片随后采用链霉素亲和素过氧化酶复合物法进行免疫组化染色显色多克隆抗体购自美国公司稀释
影响直肠癌细胞增值的因素
; 一、细胞培养; 人结肠癌细胞系CaCo2、HT29、HCT116、SW480、SW620、SW1116、LoVo均购自ATCC,并由上海消化外科研究所传代保存。LoVo采用含10%胎牛血清的F-12K培养传代;CaCo2、HT29、HCT116、SW480、SW620、SW1116均使用含10%胎牛血清的RPMI1640培养液,置于37℃、5%CO2的培养箱中,以1∶2至1∶4的比例传代培养。; 二、方法; 1.样本收集及免疫组化染色:结肠直肠肿瘤标本取自上海市微创外科临床医学中心手术室。手术标本切除后生理盐水清洗,打开肠腔,剔除瘤体表面坏死及炎性肉芽组织
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