泽泻翻译定稿.docxVIP

响应面分析法优化泽泻中泽泻萜醇B和泽泻萜醇B乙酸酯提取工艺A Yeong Lee,1 Jun Yeon Park,1 Jin Mi Chun,1 Byeong Cheol Moon,1Byoung Kab Kang,2 Young Bae Seo,3 Hyeun-Kyoo Shin,4 andHo Kyoung Kim11Herbal Resources Research Center，Korea Institute of Oriental Medicine，Daejeon，Republic of Korea2Brain Disease Research Center，Korea Institute of Oriental Medicine，Daejeon,Republic of Korea3Department of Herbalogy，College of Oriental Medicine, Daejeon University，Daejeon，Republic of Korea4Herbal Medicine EBM Research Center， Korea Institute of Oriental Medicine，Daejeon,Republic of Korea 泽泻为泽泻科多年生草本东方泽泻Alisma orientalis(Sam) Juzep.及其同种的干燥块茎。用于治疗脂溢性皮炎、湿疹、烦渴和足部水肿。我们使用配有二极管阵列检测器的高效液相色谱测定了存在于样本草药中泽泻萜醇B和泽泻萜醇B乙酸酯的浓度，鉴于泽泻萜醇B和泽泻萜醇B乙酸酯的结构，我们选择了甲醇作为最佳溶剂。我们估计泽泻萜醇B和泽泻萜醇B乙酸酯在标准提取物和甲醇中的含量分别为0.0434%和0.2365%。为了优化提取工艺,我们采用响应面分析法来预测泽泻萜醇B和泽泻萜醇B乙酸酯的产率。该法是由15个实验组成的一个中心复合设计。我们以提取时间、溶剂浓度和样品重量作为提取参数。在提取时间81分钟、甲醇浓度76%、样品重量1.25克时，泽泻萜醇B衍生物的预测浓度值为0.2388%。关键词： 泽泻；泻萜醇B；泽泻萜醇B乙酸酯；HPLC-PDA ；优化；响应面分析前言传统草药是人类历史上文献记载最全面的民间药物之一。自古以来，许多东方国家已经使用传统草药治疗大量疾病以及保持身体健康。[1 - 3]但管许多传统草药具有临床疗效，它们所包含的一系列复杂的化合物却很少能被标准化认知。液相色谱是一种分析复杂混合物的强大工具。常用于分析那些从传统草药中发现的化合物。[4]近年来,传统中药通过使用以液相色谱为基础的多种创新技术已经实现标准化认知。这些新技术包括包括毛细管电泳法、液质联用、胶束电动毛细管色谱法、高速逆流色谱法等等。[5-6]泽泻为泽泻科多年生草本东方泽泻Alisma orientalis(Sam.) Juzep. 及其同种的干燥块茎。[7-8]]这种草药被用在一些东方制剂如Taeg-Sa-San 和O-Ryeing-San中，治疗脂溢性皮炎、湿疹、烦渴、足部水肿等。[9 - 11]此外，泽泻是一种有名的东亚药物，在中国、日本、韩国和北美等地长期用来治疗感染、炎症、过敏、利尿、动脉粥样硬化、高脂血症、肾结石和糖尿病等。[9-12 - 14]泽泻含有三萜类成分，包括泽泻萜醇A、B、C、泽泻醇A 24-乙酸脂、泽泻萜醇B 23-乙酸脂 、泽泻醇、环氧泽泻烯、表泽泻醇A以及糖类，如葡萄糖、果糖、蔗糖等等。[8-9-12、14 – 16]值得一提的是，泽泻萜醇B乙酸酯是具有几种生物活性的重要化合物，包括抑制脂多糖诱导mRNA对诱导性一氧化氮合酶和一氧化氮产物的表达。它同样被发现能够抑制补体结合和抗体介导的过敏反应。[3] 早期的几份报告已经使用HPLC-UV和HPLC-ESI-MS技术测出泽泻中24-乙酰泽泻萜醇A，23-乙酰泽泻萜醇B， 23-乙酰泽泻萜醇C和泽泻醇各自的含量。[9-13-14-17-18]但尚无泽泻醇衍生物的最佳提取条件的研究。在本研究中，我们通过使用基于泽泻萜醇B和泽泻萜醇B乙酸酯浓度的曲面模型来探索其最佳提取条件。实验植物材料 泽泻标本收集于韩国顺天市，由大田大学的Young Bae Seo教授进行鉴定和干燥。泽泻(ALR 09)的凭证标本被存放在韩国东方药物研究所(KIOM)草药资源研究中心的标本馆。化学物质 泽泻萜醇B和泽泻萜醇B乙酸酯标准品(图1)购于和光化学纯品实业公司(日本大阪)。高效液相色谱级甲醇、乙醇、异丙醇，正己烷、二氯甲烷、乙腈和蒸馏水由J.T.Baker股份有限公司(Phillipsburg,NJ,USA)制得。最佳溶剂的样品制备 使用搅拌机(Shinil实业有限公司，韩国京畿道)将泽泻混合并磨成能通过相应型号筛子