第七章 紫外可见课件.ppt

一、概述 – 分子光谱 一、概述 – 分子光谱 二、紫外可见光谱 二、紫外可见吸收光谱 二、紫外可见吸收光谱 二、紫外可见吸收光谱 二、紫外可见吸收光谱 红移与蓝移 二、紫外可见吸收光谱 二、紫外可见吸收光谱 应用实例 以聚苯酰亚胺树脂微球为基体的树状间隔臂亲和色谱固定相的合成 应用实例 应用实例 直接利用间隔臂表面的仲胺基，与高碘酸钾氧化后的配位体辅酶Ⅰ（NAD）反应生成含亚胺的席夫碱，最后用硼氢化钠将生成的席夫碱还原。 化合物纯度的检验 五、紫外-可见分光光度法的应用- 有机分析 化合物在紫外光区没有明显的吸收峰 杂质在紫外光区有较强的吸收峰 杂质 试样测出的摩尔吸光系数比标准样品的小 纯度低 非多孔3-5微米的聚苯酰亚胺树脂（PPTA）微球的合成 将对苯二胺加入一定浓度的碳酸钠水溶液，再往其中滴入溶有乳化剂SPAN85、TWEEN80，以及乳化助剂正丁醇的四氢呋喃搅拌使之成均一乳液。水与四氢呋喃的体积比为：水/ 四氢呋喃=2.5/1，充分搅拌后加入80-100目的对苯二甲酰氯粉末，以一定搅速搅拌一段时间后，停止反应，反应液离心得到的沉淀分别用丙酮，乙醇，去离子水洗涤，再用浓氨水浸泡12h，最后水洗至中性即得聚苯酰亚胺树脂微球。 分析科学学报，2001，17（6），480-482 在已合成的微球基体上偶联新型树状间隔臂——聚胺基酰胺树脂（PAMAM） 三次重复的马氏加成反应和酰胺化反应 1 = NAD Standard Solution 2 = G=3.0 PPTA hydrolyzed by HCl solution, 3 = G=3.0 PPTA Connected with NAD ligand hydrolyzed by HCl solution, 4 = G=3.0 PPTA Connected with NAD ligand hydrolyzed in water solution 光电比色计 单光束 双光束 紫外-可见 分光光度计 单光束 双光束 或 单波长 双波长 比色 分析 分类 目视比色法 光度法 四、紫外可见分光光度计 目视比色法 用眼睛比较溶液颜色的深浅以测定物质的含量。 常用的目视比色法是标准系列法： 使用一套比色管分别加入一系列不同量的标准 溶液，再加入等量的显色剂和其他试剂，稀释至一 定刻度。用同样方法配制待测溶液，从管口垂直向 下观察，比较，得到待测溶液浓度。 优点：设备简单，操作简单，比色管内液层厚，颜色 易观察，在复合光下进行测定，不需严格地服 从朗伯-比尔定律。 缺点：准确度不高，若待测溶液中存在第二种有色物 质，相对误差 5% ~ 20% 光度法 用光电计测定溶液的吸光度,称之为光电比色法。 用分光光度计进行测定的方法为分光光度法。 测定原理相同 获得单色光的方法不同 (滤光片，棱镜或光栅) 光度法与目视法比较有以下优点： (1)提高了准确度 用仪器代替了人眼进行测量，消除了人的 主观误差。 (2)提高了选择性 测定的溶液中若有其他物质共存时，可选 择适当的单色光和参比溶液来消除干扰。 (3)提高了分析速度 在分析大批试样时，使用标准曲线法可简 化手续，加快分析速度。 分光光度计的种类和型号很多：单光束分光光度计、 双光束分光光度计、双波长分光光度计。 单光束分光光度计 光源 单色器 试样池 检测器 显示系统 参比池 如：国产751型、752型、721型、722型、724型。 分光光度计的分类 双光束分光光度计 光 源 单色器 试样池 检测器 显示系统 参比池 如：国产710型、730型、740型。 ? ? 切光器 双光束分光光度计是把光源发出的一束光变成两束，几乎同时通过参比溶液和被测溶液，然后同时测量透射光的强度，克服了由于光源和检测系统不稳定带来的测量误差。 双波长分光光度计 光 源 单色器 试样池 检测器 显示系统 ?1 ?2 切光器 双波长分光光度计是采用两个单色器把光源发出的光分成两束强度相同、波长分别为 ?1、 ?2的单色光交替照射到同一吸收池上，其透过光被检测器所吸收，经信号处理系统处理可直接获得溶液对不同波长单色光的吸收度之差。 单色器 ?A = A?1 - A?2 消除人工配制的空白溶液与本底之间的差别而引起的误差，可测定多组分溶液和混浊溶液。 四、紫外可见分光光度计 四、紫外可见分光光度计 Hitachi U 3010 紫外可见分光光度计 普析通用 TU-1221型 紫外可见分光光度计 分光光度法— 仪 器 波长330~800 nm