第二节植物组织的培养课件.pptVIP

通过必修课的学习，我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？ 植物组织培养：大幅度提高无性繁殖效率 营养繁殖 扦插 嫁接 压条 一、导言 扦插 嫁接 压条 　　在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织或细胞，在适宜的培养条件下诱导其产生愈伤组织、丛芽和完整植株的技术。 二、植物组织培养技术 1.植物组织培养 2.植物组织培养的原理是什么？ 植物细胞具有全能性。 3.植物细胞具有全能性的原因： 生物体的每个细胞都携带着一套来自受精卵的完整基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。 4.全能性大小的比较 ①受精卵＞生殖细胞体细胞 ② 体细胞中：幼嫩组织细胞（芽尖）＞成熟组织细胞 常用的植物激素： 2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA） 细胞分裂素类： 激动素（KT）、、玉米素（ZT）6－苄氨基嘌呤（ 6－BA） 赤霉素类： 赤霉酸（GA3） 生长素类： 5.植物组织培养的影响因素 ①植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。 ②此外生长素和细胞分裂素的浓度和使用的先后顺序以及温度（ 18－22℃ ）、空气、无菌环境、适合的PH （5.8左右）、适时光照（每日用日光灯照射12h）等。 生长素/细胞分裂素 高 ：利于根的形成 适中：有利于愈伤组织分化 低：有利于芽的形成 6.植物组织培养的基本过程: 离体的植物器官、组织、细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根 芽 植物体 营养、激素等 营养、激素等 ②外殖体：从活植物体上切下进行培养的那部分组织、器官或细胞。 相关概念: ③脱分化：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。 ④再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新诱导根、芽等器官的分化，这个过程叫再分化。 ①愈伤组织:具有分裂能力、排列疏松而无规则，是高度液泡化而无定形状态的薄壁细胞。 ⑤试管苗：在植物组织培养基中由愈伤组织诱导形成的植物幼苗，叫试管苗 植物组织培养过程示意图 没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。 2.植物组织培养的过程技术措施 （1）植物组织培养时为什么在无菌条件下进行？ 由离体的植物器官、组织或细胞形成愈伤组织必须在无菌条件下进行。只有在这样的条件下，才能保证培养出的细胞是正常细胞，否则培养基内许多其他微生物与离体细胞争夺营养与生存空间，难以形成愈伤组织。 （2）在培养过程中为什么要转换培养基？ （3）为什么愈伤组织一般先诱导分化产生芽，然后再诱导分化产生根？ 诱导离体的细胞、组织和器官的脱分形成愈伤组织、再分化形成芽和根所需条件特别是植物激素的条件不同，所以，在培养过程中针对不同的阶段任务，有时需要转换培养基。 如果先诱导生根就很难再诱导生芽。 三、植物组织培养的应用 1.快速繁殖、培育无病毒植物 2.可以通过大规模的植物细胞培养来生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂。如：紫草愈伤组织中提取紫草素，能治疗烫伤、割伤以及作为染料和化妆品的原料。 3.培育农作物新品种 4.转基因植物的培养 四、天竺葵的组织培养 (一)设备及用品 100ml三角瓶或大口培养瓶 2. 镊子 3. 超净台 灭菌锅 5.封口膜和橡皮圈 6. 有棉球的广口瓶 7. 酒精灯 8.三角漏斗 9.培养皿 (二)材料 MS培养基(用于配置发芽和生根培养基并灭菌) 注意：奈乙酸用少量0.1mol/LNaOH溶液溶解,苄基腺嘌呤用少量0.1mol/LHCL溶解 (三)步骤 1.制备MS培养基 ①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保存 ②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液 ③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量 （1）配置各种母液 （2）配置培养基 ① 配制培养基（固体） ② 调PH ③培养基的分装 分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml 由于天竺葵的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素 （3）灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌 2.外植体的消毒 3.接种（无菌操作） 思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？ 答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。 ①.生芽培养 ②.生根培养 4.培养 （1）愈伤组织的培养 (2)试管苗的培养 接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒。培养温度控制在18-22℃，并且每日用日光灯光照12小时。 5.转