外周动脉闭塞症中通过吲哚布芬降低中性粒细胞活化.docVIP

外周动脉闭塞症通过吲哚布芬中性粒细胞Chello, Massimo; Mastroroberto, Pasquale; Celi, Vittoria; Romano, Ferdinando; Marchese, Antonietta R.; Colonna, Alfredo Chello 作者信息Dipartimento di Medicina Sperimentale e Clinica, Facoltà di Medicina e Chirurgia, Catanzaro; and *Cattedra di Igiene, Facoltá di Medicina e Chirurgia “G. DAnnunzio,” Chieti, Italy 1995年6月19日收到，1995年11月27日修订Dr. M. Chello at Via S. Giacomo dei Capri 29, 80128 Napoli, Italy。 摘要缺血再灌注模型我们评估中性粒细胞活化的有效性。患者随机分为两组腿部闭塞动脉病间歇性跛行。患者治疗200 mg口服，每日两次 (p.o. b.i.d.)持续一个星期第二组患者接受安慰剂。两组患者标准跑步机练习，直到发生跛行。股静脉引流缺血腿血液样本血栓素B2（TxB2）和6酮前列腺素F1[α]（6-k-PGF1[alpha]）中性粒细胞过滤和中性粒细胞活化（硝基四氮唑蓝）血浆水平进行评估，休息和跛行530和60分钟后。在休息和跛行后1小时测定尿白蛋白排泄。安慰剂组跛行5分钟，血栓素TxB2和6酮前列腺素F1[α]血浆水平增加，而治疗只是略有增加。血小板和中性粒细胞被认为病理生理血管疾病，通过增加小血管闭塞和血液粘度低剪切速率微循环功能不全。以往的研究表明，间歇性跛行患者可能凝血活性，增加血液粘度增加红细胞和血浆纤维蛋白原，增加白细胞活化僵硬（1-3）。与正常人相比（4,5）缺血患者全血过滤受到损害静脉引流缺血区过滤性能降低系统。在缺血条件下中性粒细胞局部损害灌注确定影响血管内皮细胞（6）并释放花生四烯酸代谢产物（7）氧自由基（8）和血小板活化因子（9），导致内皮细胞损伤血管通透性增加。先前证明反映血管通透性尿白蛋白排泄，跛行者运动增加，并与中性粒细胞过滤降低血清溶菌酶（10）。是一种环氧化酶可逆抑制剂临床症状已时间（11,12）临床实验评估。我们希望临床缺血再灌注确定中性粒细胞活化的影响。方法明显间歇性跛行患者随机分成两组间歇性跛行因血管造影证实闭塞患者治疗200 mg口服，(p.o.)每日两次(b.i.d.) 持续一个星期第二组患者接受安慰剂。在研究前2周研究无报告在休息疼痛或呈坏疽或血液流变性。慢性肺病糖尿病下肢骨关节病或限制他们步行距离其他疾病患者被排除在外。在所有下肢间歇性跛行症状患者中，踝关节及上肢收缩压之间比0.85。这项研究双盲方式，卡坦扎罗医学院伦理委员会批准。所有患者知情同意研究方案受影响的腿18-gauge软导管进行股静脉逆行插管10分钟股静脉血液样本。患者都在跑步机测功仪上走12°仰角和3公里/h速度直至跛行疼痛发生。分钟后，从股静脉第个血液样本30和60分钟，第个和第个样品。中性粒细胞过滤中性粒细胞过滤粒细胞悬浮过滤器（5μm孔径）。粒（97%中性粒细胞）密度梯度离心法肝素血液分离修正恒定浓度1.5 × 109个细胞/L然后静水压力下这种悬浮液聚碳酸酯过滤器（5μm），90秒10秒滤液累积量log图，得出1条直线（所有r0.99），流速为每分钟毫升中性粒细胞存活率98%，胎盼兰拒染试验我们评估该技术样本5%。 氮蓝四唑（NBT）中性粒细胞降低NBT染色，这与增强超氧阴离子自由基有关。这是中性粒细胞激活后的呼吸爆发现象。Neumann及其同事所述方法在新鲜血液NBT测试（5）：0.2ml肝素化血液37℃下培养10分钟，之后0.2ml 0.1% NBT溶液在磷酸盐缓冲盐水。该混合物37°C15分钟，然后在室温（21°C25°C）15分钟。涂片制备NBT和血液混合物。空气干燥，涂片瑞氏色素染色。在每个，100中性粒细胞计数。含有甲臜至少核叶大小中性粒细胞百分比作为NBT得分花生酸测量血栓素B2（TxB2）和6酮前列腺素F1[α]（6-k-PGF1[alpha]）评估血液样股静脉血栓素B2和6酮前列腺素F1[α]分别体内TxA2和前列环素。对于每个样品，聚丙烯注射器5 ml血液含0.2 mg阿司匹林0.05 ml 15% EDTA溶液的试管。在室温下管摆动篮转离心15分钟2300 g）。然后收集血清，-20°C时冷冻，直到免疫技术花生酸检测（13）。所有的结果每毫升血清复合尿肌酐/白蛋白比值尿液样品Hickey及其和同事（10）。受试者膀胱休息小时，然后膀胱，中段尿（MS