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基因工程
〖考纲解读〗
本专题内容命题热点主要有以下几个方面:
基因工程的原理及技术
基因工程的基本工具
基因工程的基本操作过程
基因工程的成果及应用
近几年高考命题的题型主要为信息材料题。本内容涉及生物的热点和边缘知识在今后的命题中还将是重点考查的内容。
〖专题结构模型〗
〖知识梳理〗
一、基因工程的概念
基因工程是指按照 ,将一种生物的基因在 剪切,并与特殊的
进行重新组合,然后转入 进行扩增,并使之表达产生
的技术。基因工程可以 改造生物遗传性状。
二、基因工程的工具“基因手术刀”—— 能够识别双链DNA分子的某种 核苷酸序列, 部位的两个核苷酸之间的 断开,形成 ,因此具有 性。
2.“基因缝纫针”—— 键3.“基因运输车”—— 具备的条件:
1) 2)
3)
基因工程中使用的载体有: 和 等。其中最常用的是 。
三、基因工程的基本 、
、 、 。
(一) 目的基因的获取
获取目的基因的方法:原核基因采取 获得,真核基因是 。人工合成目的基因的常用方法有 和 。
(二) 重组载体的构建(基因工程的核心)
①用一定的限制性内切酶切割质粒,露出
②用 切断目的基因,使其产生
③将切下的目的基因的片断插入质粒的切口处,质粒的粘性末端与目的基因的粘性末端因 而结合,再加入适量的 ,形成
(三)目的基因导入与筛选
受体种类不同,转化方法:
将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法 ,其次还有 和 等。
②将目的基因导入动物细胞:最常用的方法 。此方法的受体细胞是 。
③将目的基因导入微生物细胞:
A.一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列
B.限制性内切酶的活性受温度的影响
C.限制性内切酶能别和切割RNA
D.限制性内切酶可从原核生物中提取
【解析】限制性内切酶存在于许多细菌及酵母菌等生物中,细菌属于原核生物,当然可以从中提取,一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序,并能切割DNA分子,限制性内切酶的活性同样受温度的影响,故选C。
【答案】 C
[例2] :(1)限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。
③在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来?为什么?
【解析】本题考查的知识点是限制性内切酶的作用和特点以及黏性末端的特点与连接。限制性内切酶能识别DNA分子上特定的序列和切点并进行切割,限制性内切酶具有专一性,即一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列。被限制内切酶切开的DNA两条单链切口,各含有几个伸出的、可互补配对的核苷酸,这种切口就是黏性末端。黏性末端之间,只要切口处伸出的核苷酸间存在互补,就能在DNA连接酶的作用下连接起来。虽然限制性内切酶I和限制性内切酶II识别的序列和切点是不同的,但是形成的黏性末端是相同的,存在着互补关系,因此在DNA连接酶的作用下是可以连接起来的。
【答案】
①
②
③可以连接。因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的(或是可以互
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