细胞凋亡与检测原理课件.pptVIP

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  • 2016-12-21 发布于浙江
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细胞凋亡与检测方法 细胞坏死 (细胞被动性死亡) 细胞受到急性强力伤害时,立即出现的早期反应。是病理条件下细胞死亡的过程。 细胞肿胀,线粒体和内质网肿胀。 核染色质随机降解呈絮状, 蛋白合成减少。 细胞膜、溶酶体破裂, 细胞内容物流出,引起周围炎症 细胞凋亡 (细胞主动性死亡) 多细胞有机体为调控机体发育、维持内环境稳定,由基 因控制的细胞主动性死亡过程。又称程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD). 从严格的词学意义上来说,PCD与凋亡是有很大区别的 二、细胞凋亡的检测方法 (二) 形态学方法 借助普通光学显微镜,荧光显微镜或透射电镜对培养细胞,细胞涂片或者组织切片进行形态学观察。细胞凋亡的形态特征分为3部分: 凋亡的起始 凋亡小体的形成 凋亡小体被邻近细胞或吞噬细胞吞噬清除 下面以碧云天生物技术公司生产的细胞凋亡-hoechst染色试剂盒为例 (三)电泳法 在细胞凋亡时,内源性mg2+、ca2+依赖性核算内切酶被激活,对DNA的切割有3种形式。即核小体间DNA链的断裂、大分子DNA链的断裂以及DNA单链的断裂。用胰酶消化体外培养细胞,经PBS洗涤,用蛋白K消化,酚-氯仿抽提凋亡细胞的基因组DNA,取5ug琼脂糖凝胶电泳,紫外灯下观察可见特征的‘梯状’(ladder)DNA条带。 该方法

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