第二节紫外可见分光光度计探究.ppt

一、基本组成 general process 二、分光光度计的类型 types of spectrometer 第二节 紫外—可见分光光度计 UV-VIS spectrometer 仪器 紫外-可见分光光度计 一、基本组成 general process 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 1. 光源 在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500nm。 紫外区：氢、氘灯。发射185～400 nm的连续光谱。 氙灯：紫外、可见光区均可用作光源 ?/nm 钨灯（热辐射光源） 400 600 800 1000 氙灯（气体放电光源） 氢灯 强度 400 600 800 1000 λ（nm） 氙灯 氢灯 钨灯 2.单色器 将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出任一波长单色光的光学系统。 ①入射狭缝：光源的光由此进入单色器； ②准光装置：透镜或反射镜使入射光成为平行光束； ③色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅； ④聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝； ⑤出射狭缝。 光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm )。 －平面透射光栅 －反射光栅（广泛使用） 波长范围宽, 色散均匀, 分辨性能好, 使用方便. 利用光通过光栅时发生衍射和干涉现象而分光。 棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同。. 玻璃350～3200nm, 石英185～4000 nm 3.吸收池 (比色皿)用于盛待测及参比溶液。 吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。 4.检测器 利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管或光电倍增管。 5. 结果显示记录系统 检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理 硒光电池 光路示意图 分光光度计内部光的传播途径 二、分光光度计的类型 types of spectrometer 1.单光束 特点： 简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光率，不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。 使用时来回拉动吸收池,比色皿配对 722型分光光度计结构方框图 光源 吸收池 检测系统 分光系统 显示系统 2.双光束 特点： ●自动记录，快速全波段扫描。可消除光源和检测系统的不稳定性。 ●不用拉动吸收池，可以减小移动误差 ●仪器复杂，价格较高。 参比池 样品池 3.双波长 将光源发出的光分成两束,分别经过两个单色器,得到两束强度相同、波长不同的单色光(λ1、λ2)，使之 快速交替通过同一吸收池而后到达检测器。得到 双波长测量的相对吸光度值. 特点：1.无需参比池。 2.通过选择波长消除干扰，提高选择性。△?= 1～2nm。两波长同时扫描即可获得导数光谱。 Ab为背景吸收或干扰物质的吸收，选择合适的波长，使得λ1、λ2处Ab相同。 λ2 λ1 I1 I2 4. 其他类型分光光度计 多通道仪器（Multichannel Instruments） 光电二极管阵列(通常具有316个硅二极管) photodiode arrays (PDAs) 同时测量200～820nm范围内的整个光谱, 比单个检测器快316倍,信噪比增加3161/2 倍. 纤维光度计 将光度计探头放入样品中, 原位测量. 对环境和过程监测非常重要. HP 8452A多通道二极管阵列分光光度计 纤维光度计示意图 纤维光度计