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意识决定 交叉配血知识讲座 二、血 型 1.红细胞悬液的配制 用于血型鉴定、配血等的红细胞至少要用大量生理盐水洗一次,其目的是通过洗涤可以去除红细胞表面的物质,如少量的血浆蛋白、已溶解红细胞的基质,他们有竞争抗体的作用,还有抗凝剂,他们有抗补体的作用。 5.加样时先加血清再加红细胞，以避免漏加；抗体和抗原的比例一般为2：1。 6.必须要做正反定型实验才能确定血型。 7.正定型试验如果有条件可加做抗AB,可用来检测弱A和弱B ,反定型一定要加做O细胞,可用来发现不规则抗体。 8.盐水试验多采用立即离心法,正确的操作是红细胞悬液加到血清后立即离心并观察结果。反应时间过长而延误立即离心的时间对ABO血型系统的抗体检出影响较大。 ①如果在室温放置2分钟后离心,可能使3+-4+的凝集减弱为0+-1+,并伴有溶血现象。 ②如果在室温放置5分钟后离心,原有的凝集可能消失,并有溶血。 ③ 有的标本在延迟离心后,本来应有的凝集会变为既不凝集 也不溶血,因而难以发现ABO血型的不配合。这多数发生在O 型人的血清抗体与A型、B型或AB型红细胞反应的试验中,发 生率为2%-3%。发生上述的原因是反应强的抗A、抗B和抗 原强度强的A、B抗原作用,补体C1在有Ca2+存在的条件下, 固定到红细胞膜上,妨碍了红细胞的凝集,进一步可能引起溶 血。解决的方法： A:血清与红细胞混合后立即离心。 B:用血浆或灭活的血清做试验 C:用EDTA盐水配制红细胞悬液, D:稀释血清 9. 正反定型不一致的原因 一般正反定型结果不一致有技术原因也有受检红细胞或血清 本身的的问题。 ■（1）技术和管理错误---ABO定型中产生异常结果主要原因 标本和试剂搞错，造成假阳性或假阴性的结果。 器材不洁产生假阳性结果。 试剂污染或不足，产生假阳性或假阴性的结果。 离心过度或不足，产生假阳性或假阴性的结果。 阳性反应产生溶血现象未能识别，导致假阴性结果。 漏加试剂，产生假阴性结果。 结果记录或判断错误，产生假阳性或假阴性结果。 ■（6）近期曾异型输血，使病人血液标本成为不同型别的红细胞混合物，定型时显示“混合 外观凝集”现象。 ■（13）低丙种球蛋白血症 可能会因免疫球蛋白 水平全面下降使血清定型时不见凝集或仅见弱凝集 反应。 正反定型不一致的处理方法 如发现ABO正反定性不一致，首先要重做试验一次。严格 执行操作规程，使用质量合格的试剂以及细心观察结果，可 解决明显的问题，对一些疑难问题需进一步检查。可初步采 取以下措施： （3）对受检者作直接抗人球蛋白试验，看红细胞有没 有被致敏 常用的记录符号及所示的凝集强度 4+:一个大的凝集块,背景透明,无游离细胞 3+:数个大凝集块,背景透明,无游离细胞 2+:许多小凝集块,肉眼可见,大小均匀,背景基本透明,有游离细胞 1+:很小的凝集块,肉眼可见,背景不透明,游离细胞较多,需要用显微镜观察 W+:微小凝集块,肉眼很难看清,背景混浊,需要用显微镜观察 O:无凝集,无溶血,全部是游离细胞,要用显微镜观察 PH:部分溶血 H:完全溶血 WF:混合外观 疑难血型病例 1.白血病血型变异 2.血浆蛋白紊乱 3. 类B 4.多/全凝集 5.冷凝集 6.ABO亚型 三、不规则抗体的筛选 1.所谓不规则抗体是指抗A、抗B以外的血型抗体，其多为ＩｇＧ抗体。主要是经输血或妊娠等免疫刺激产生。进行不规则抗体的筛选的目的是发现有临床意义的不规则抗体，以确保安全用血，有效用血，有条件或时间允许的情况下最好献血者血清也作不规则抗体的筛选，如有发现不规则抗体，鉴定此抗体，找出能与其相配合的血液，不可随便用于输血。因为多为ＩｇＧ抗体，在盐水介质中不能凝集而只能致敏相应抗原的红细胞,必须通过特殊介质(酶、抗人球蛋白、ｐｏｌｙ等)才能使致敏红细胞出现凝集反应，这些方法的选择可按抗体的血清学行为和试验的具体条件来确定。临床上通常所称的“同型血”实际上是指ＡＢＯ血型系统和Ｒｈ血型系统相同,其它红细胞血型系统未必相同。如果交叉配血不仔细,或者只用盐水介质配血,则有可能检查不出ＡＢＯ血型系统之外的不规则抗体,而此抗体与相应抗原发生免疫反应,可导致溶血性输血反应的发生。 2.筛选细胞通常是由2-3个单人份的O型红细胞组成一 套筛选细胞试剂，包括以下常见的抗原：Rh系统 、 MNSs系统、P系统、Lewis系统、Duffy系统等。 不规则抗体筛选的操作步骤 病人/被检血清 + 抗体筛选细胞 → 盐水介质 非盐水介质（聚凝胺、抗球蛋白、酶）