实验4、沉淀反应(二)课件.pptVIP

实验四 沉淀反应（二） 实验内容 免疫电泳 单向扩散电泳 一、免疫电泳 原理： 区带电泳后进行双相琼脂扩散实验。 将待测标本置于琼脂凝胶中电泳，样品中各蛋白成分因分子量及电泳迁移率不同，被分成肉眼不可见的若干区带。电泳结束后，沿与电泳方向平行的两侧开槽并加入抗血清，置室温或37度使两者扩散。18-24h后，各区带蛋白与相应的Ab在相应的位置上形成弧形沉淀线。Ag越多，沉淀线越靠近Ab 槽，其沉淀线越粗，可做细微的蛋白质组分分析，仅为定性实验。 用途： 定性实验，主要用于纯化Ag和Ab成分的分析及正常和异常免疫球蛋白的识别和鉴定等方面。 试剂和器材： 1.2%的琼脂、打孔器、小木块、小刀、 直尺、加样枪及枪头、1:2人血清 、抗人全 血清、毛滴管、湿盒、电泳槽、电泳仪等 实验方法 1. 浇板：吸热琼脂4ml浇板。 2. 打孔、挖槽（槽中琼脂暂时不取出） 3. 加样（Ag）：正常人血清10ul（1:2稀释） 4. 电泳：稳压80-100v，1h（看到电泳的位置快到 槽头左右即可）。 5. 加样（Ab:）取出后，将槽中琼脂挖出，加入抗 人全血清（