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- 2016-12-22 发布于天津
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2010届第二学期高三生物一轮复习教学案017
选修一 多聚酶链式反应扩增DNA片段
【学习目标】
1、了解PCR技术的基本操作 2、理解PCR的原理 3、讨论PCR的应用
【知识梳理】
一、PCR技术扩增DNA的过程,与细胞内DNA复制过程类似:
1.1细胞内DNA复制条件分析:
条件 组分 作用 模板 DNA的两条单链 提供复制的模板 原料 四种脱氧核苷酸 合成DNA子链的原料 酶 解旋酶
DNA聚合酶 打开DNA双螺旋
催化合成DNA子链 能量 ATP 为解螺旋和合成子链供能 引物 RNA 为DNA聚合酶提供合成的3’端起点
1.2细胞内DNA复制过程
(1)DNA的反向平行结构:
由核苷酸通过3,5-磷酸二酯键连接形成核苷酸长链,DNA双螺旋结构的反向平行结构:
(2)DNA的复制过程:
解 旋:解旋酶、ATP,DNA两条链打开,,形成两条DNA单链。
引物结合:在DNA单链3’端与DNA反向配对结合,确保引物3’端与DNA单链准确配对。
DNA聚合酶结合:
子链合成:DNA聚合酶从引物3’端开始,将配对的脱氧核苷酸连接起来。
后续加工:DNA聚合酶I将引物切去,并合成空缺处的DNA单链,再由DNA连接酶将不连续的DNA子链连接起来。
子链合成特点:不能从头合成;合成方向为“5’→3’合成”。
感悟生命的神秘:DNA聚
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