KDN定氮仪测定豆粕氮含量的方法验证.docVIP

KDN定氮仪测定豆粕氮含量的方法验证 　　[摘 要]利用KDN―08C消化炉和KDN―08C定氮仪，按照国家标准、参考仪器使用说明书，通过对6份不同质量的优级纯硫酸铵（化学式：（NH4）2SO4）基准试剂中含氮量进行测定、并对2份加入不同质量硫酸铵基准试剂的豆粕样品进行回收率测试，该方法的回收率为99.9%～101.6%，符合国家检验方法标准《谷物和豆类氮含量测定和粗蛋白质含量计算 凯式法》（GB/T5511―2008）的“回收率应大于或等于99.8%”的要求。 　　[关键词]豆粕；氮；测定；方法；验证 　　中图分类号：S816 文献标识码：B 文章编号：1009-914X（2014）34-0173-02 　　1 测定方法原理（凯式原理） 　　蛋白质是含氮的有机化合物。粮食样品和硫酸及催化剂被一起加热消化，使蛋白质分解，分解产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵，然后在碱化蒸馏作用下使氨游离，释放出来的氨气和水蒸气经过冷凝管冷凝后，进入装有硼酸的锥形瓶中，被硼酸吸收后生成硼酸铵，再用硫酸标准溶液滴定，根据硫酸标准溶液的消耗量乘以蛋白换算系数来计算粗蛋白含量[1]。 　　消化过程：R?C?H?NH2/COOH?H2SO4→CO2↑?SO2↑?NH3H2O 　　2NH3?H2SO4→（NH4）2SO4 　　蒸馏与吸收过程：（NH4）2SO4?2NaOH=Na2SO4?2NH3↑?2H2O 　　2NH3?4H3BO3=5H2O?（NH4）2B4O7 　　滴定过程：（NH4）2B4O7?H2SO4?5H2O=（NH4）2SO4?4H3BO3 　　2 试验材料 　　2.1 试验样品 　　豆粕样品2份（样品来源：扦自于锦州吉祥饲料有限公司、锦州兴农饲料有限公司）。 　　2.2 仪器设备 　　消化炉（上海赛霸精密仪器有限公司KDN―08C型），定氮仪（上海赛霸精密仪器有限公司KDN―08C型），电子天平（沈阳龙腾电子称量仪器厂MODEL型 感量0.1mg），电子天平（常熟市双杰测试仪器厂JJ300型感量1mg），实验电动粉碎机（上海沪粤明科学仪器有限公司JFSDⅡ型）。 　　2.3 化学试剂 　　硫酸铵（优级纯、纯度99%）、硫酸（分析纯）、氢氧化钠溶液（400gNaOH+ 　　1000mlH2O）、正辛纯（分析纯）、蒸馏水、硫酸溶液（0.05021mol/l）、硼酸溶液（2%）、硫酸钾（分析纯）、五水硫酸铜（分析纯）、浮石、指示剂：0.1%甲基红?0.5%溴甲酚绿（1?1） 　　3 试验方法 　　3.1 使用硫酸铵基准试剂测定方法的回收率 　　3.1.1 称样：准确称取硫酸铵（优级纯、纯度99%）：0.0995g（相当于含氮0.0211g）、0.1991g（相当于含氮0.0422g）、0.2034g（相当于含氮0.0844g）、0.4582g（相当于含氮0.0971g）、0.6322g（相当于含氮0.1340g）、0.7963g（相当于含氮0.1688g）。 　　3.1.2 样品消化： 　　3.1.2.1 将称好的硫酸铵基准试剂分别加入6支消化管中，每只消化管在各加入0.2g五水硫酸铜、6g硫酸钾、20ml硫酸和少量浮石，同时做空白试验2个。 　　3.1.2.2 把消化管分别放入消化架各孔内，然后置于KDN―08C消化炉上将装有密封圈的排污管连接好（稍加旋转消化管使其口密封）。 　　3.1.2.3 打开抽气三通进水（自来水），使抽气三通处于抽气状态。 　　2.1.2.4 接通KDN―08C消化炉电源，打开各自控制开关，调节温度控制单元至420℃±10℃，使其开始加热消化。待溶液消化至无微小颗粒、呈蓝绿色时继续消化10min（整个消化过程用时约30min）[2]。 　　3.1.2.5 消化结束后，将消化管及排污管和整个托架一起移到冷却架上进行冷却，冷却过程排污管必须保持抽气状态，防止废气溢出。 　　3.1.3 消化液蒸馏 　　3.1.3.1 用橡胶管连接KDN―08C型定氮仪左下方各个相对应接口：氢氧化钠接口、蒸馏水接口、冷却水（自来水）接口。 　　3.1.3.2 先打开定氮仪面板上“电源“开关（仪器进入自动加水状态），然后打开面板上“蒸汽”开关（仪器开始自动加热），再打开自来水龙头，直到蒸汽从仪器前下方蒸馏塑料管内喷出（保持此状态0.5min），关掉蒸汽开关，仪器加入待机状态[3]。 　　3.1.3.3 把盛有50ml硼酸溶液（2%）的锥形瓶放在定氮仪前面托盘上，使蒸馏塑料管的末端浸入硼酸溶液中。按压蒸汽管下端托盘，把消化好样品的消化管套在蒸馏塑料管下端的平台上，稍加旋转消化管使其与上部蒸馏器密封圈接口密封，抬上弹簧平台，关上保护罩。 　　3.1.3.4 打开面板上的蒸馏水开关