基因工程复习学案11111.docVIP

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第一章基因工程和蛋白质工程 考纲要求:1、基因工程的诞生 Ⅰ 2、基因工程的原理及技术Ⅱ 3、基因工程的应用Ⅱ 4、蛋白质工程Ⅰ 知识梳理: 一、基因工程的概念 基因工程是指 ,进行严格的设计,通过 ,赋予生物以 ,创造出 。基因工程是在 水平上进行设计和施工的,又叫做 。 (一)基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”—— (1)来源:主要是从 中分离纯化出来的。 (2)功能:能够识别 ,并且使每一条链中 部位的两个核苷酸之间的 断开,因此具有 性。 (3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式: 等。 2.“分子缝合针”—— (1)功能:缝合 。 (2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将 加到已有的核苷酸片段的末端,形成 。DNA连接酶是连接 的末端,形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”——载体 (1)载体具备的条件:① 。② 。③ (2)最常用的载体是 ,它是一种裸露的、结构简单的、独立于 之外,并具有 能力的双链 分子。 (3)其它载体: (二)基因工程的基本操作程序 第一步: 1.目的基因主要是指: 。 2.方法: 限制酶 运载体 ①直接分离法:供体细胞中的DNA→ DNA片段→ 受体细胞→DNA片段扩增 →含目的基因的细胞→目的基因 ②反转录法:逆转录 合成 mRNA → 单链DNA → 双链DNA ③人工合成法: 第二步: 1.目的:使目的基因在受体细胞中 ,并且可以 ,使目的基因能够 。 2.组成: + + + 标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是 。 第三步: _ 1.转化的概念:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持 的过程。 2.常用的转化方法: 将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是 ,其次还有 和 等。受体细胞可以是卵细胞(受精卵)、体细胞(经组织培养成为完整个体) 将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是 。此方法的受体细胞多是 。 将目的基因导入微生物细胞:感受态细胞法:用 处理大肠杆菌,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。 3.重组细胞导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。 第四步: 1.首先要检测 转基因生物的染色体DNA上是否插入了 ,方法是采用 。 2.其次还要检测 目的基因是否转录出了 ,方法是采用 。 3.最后检测 目的基因是否翻译成 ,方法是从转基因生物中提取 蛋白质,用相应的 抗

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