高密度培养全解.pptVIP

* * 基因工程菌高密度培养 High Cell-Density Culture 浙江工业大学 杭州 课前思考： 1、为什么凉开水养不活鱼？ 2、为什么菜市场卖鱼的地方需要一个鼓气设备？ 3、什么物质在水中的溶解度随着温度的升高而降低？ 4、进一步增加鱼的密度，而且要保证鱼不死，你能想出其它办法吗？ 高密度培养： 单位体积内细胞数量高于常规的培养模式。 E.coli最高密度理论值：400g/L（DCW Dry Cell Weight） 国外达到：200g/L 国内小于50g/L 高密度培养的意义： 1、节约诱导剂的用量：摩尔浓度相同，体积越小，诱导剂用量越少。 2、节约劳动强度； 3、强化纯化工艺，单位体积细胞数量越大，产物的浓度越高，纯化越方便，收率越高。 实现高密度培养的技术关键： 1、解决氧的供应问题 a、溶解氧（Dissolved Oxygen) 0.25mM 为饱和浓度 b、气液接触面积越大，供氧越快； c、氧气的分压越大，供氧越快； 2、解决养料的供给问题 微生物细胞的生长需要供应足够的养料，包括： a、碳源：葡萄糖、甘油 b、氮源：氨水、尿素、铵盐等 c、磷：磷是DNA的组成成分 酵母膏、蛋白胨等可以提供全面的营养 3、解决环境毒性问题