高效液相色谱法全解.pptVIP

键合相的特点 使用过程中不流失； 化学稳定性好； 适于梯度洗脱； 载样量大 注意： 流动相的pH一般应在3-8，否则会引起硅胶溶解；(也有适用宽pH范围的键合相)。 键合相的性质和特点 二、化学键合相色谱法的流动相 对流动相的要求： 与固定相不发生化学反应。 对试样有适宜的溶解度。使k在1~10范围内， 与检测器相适应。例如用紫外检测器时，选用截止波长小于检测波长的溶剂。 纯度高，粘度小。低粘度流动相如甲醇﹑乙腈等可以降低柱压，提高柱效。 （一）流动相对分离的影响 n由色谱柱（固定相）性能决定， α主要受溶剂种类的影响， k受溶剂配比的影响。 （二）流动相的强度和选择性 溶剂的极性（强度） 正相色谱：溶剂极性越强，洗脱能力越强 反相色谱：极性弱的溶剂洗脱能力强 溶剂的选择性 不同种类的溶剂，分子间的作用力不同，故选择性不同 混合溶剂（二元或多元流动相） 三、分离条件的选择 （一）HPLC中的速率理论 涡流扩散　A=2λdp 球形、小粒度、均匀（RSD＜5%）固定相，匀浆高压填充，以降低A。 纵向扩散　β=2γDm 可以忽略。 因为Dl很小，室温操作，且U大于U最佳， HPLC中的速率理论 传质阻抗 固定相传质阻抗CS可以忽略 ，因df极小 流动相传质阻抗Cm 要求： dp小，Dm大 静态流动相传质阻抗 ： 由于部分流动相在固定相微孔内的滞留 静