舌癌单细胞培养建系与癌干细胞相关标志的检测.docVIP

舌癌单细胞培养建系与癌干细胞相关标志的检测 　　[摘要] 目的 以舌癌Tca8113M1细胞系单细胞培养建系为基础，观察Tca8113M1细胞系中舌癌干细胞存在的现象及其相关标志的变化规律。方法 选取Tca8113M1细胞系，以有限稀释法进行体外单细胞培养并建立细胞亚系，在证实其成瘤性的基础上，进一步采用流式细胞术检测癌干细胞相关标志CD44、CD184、细胞外可溶性抗原（ESA）的表 　　达情况，着重观察单个细胞培养形成细胞克隆的形态与时间。结果 以有限稀释法获取192个Tca8113M1舌癌单个细胞，在96孔板中进行体外培养，获取12个细胞亚系（获取比例为6.25%），均有高成瘤性。癌干细胞相关标志CD44 　　与ESA均为高水平表达，而CD184表达则在12个细胞系之间有差异。在单个细胞培养中，形成完全克隆、部分克隆与旁克隆3种形态，12个细胞亚系均源于单个细胞形成的完全克隆，均可进行连续传代与扩增，而部分克隆与旁克隆则在后续培养中逐渐衰老与消亡。结论 Tca8113M1细胞系中可能存在癌干细胞，而单细胞培养可形成完全克隆并建立细胞亚系，是进行舌癌干细胞后续研究重要的细胞培养模式。 　　[关键词] 单细胞； 有限稀释法； 舌癌干细胞； 完全克隆 　　[中图分类号] Q 21 [文献标志码] A [doi] 10.7518/hxkq.2013.01.021 癌