抽取DNA[第一場]-元智大學.pptVIP

DNA的抽取 元智大學通識中心 康世旭 細胞的內容物 水 蛋白質 核酸（DNA與RNA) 醣類 礦物質與維生素（少量） 如何把DNA萃取出來 水（溶劑） 蛋白質（溶質，遇到phenol之類的有機溶劑，被失去功能，並且會沈澱出來） DNA（溶質，不怕phenol之類的有機溶劑，但在鹼性溶液中，結構會發生改變） 染色體（大分子的DNA，3000~ 106 kb) 質體（小分子的DNA，2~1000 kb) 醣類與礦物質、維生素：一般而言，少量，不影響我們的實驗 DNA結構與變性 質體與染色體 實驗器材與藥品 電泳槽 Micropipette 竹籤 手套 離心機 Quich screening buffer Phenol/chloroform 流程 以竹籤刮取菌（看得到菌塊就好了） 將沾有細菌的竹籤一端放在eppendorf中 流程 加入quick screening buffer(鹼性液體） 將菌塊抖散quick screening buffer中 兩分鐘後，加入phenol/chloroform（可中和鹼性，並將蛋白質變性沈澱） 離心三分鐘 流程 觀察離心後的結果 取10 ul DNA溶液，與2 ul loading dye混合，進行DNA電泳 染色，觀察結果 * * 在鹼性溶液或被加熱時 當DNA分子太大時，無法回復為原形 tip eppendorf tip eppendo