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聚合酶链反应 Polymerase Chain Reaction 拟探讨的主要内容 基本概念 PCR的基本原理 PCR引物设计的原则 PCR 模板的制备 PCR反应条件的控制及注意事项 PCR技术的主要类型 PCR技术的应用 基本概念 聚合酶链反应　PCR 　　模仿生物体内DNA复制的一种特异性的DNA片段的体外酶促合成（扩增）方法。具体而言， PCR是在模板ＤＮＡ和四种三磷酸脱氧核糖核苷酸底物存在的一定缓冲体系中，由ＤＮＡ聚合酶催化一对引物间特异ＤＮＡ片段的合成过程。 特点: 特异性、高效率、和忠实性。 　 PCR的基本原理 PCR反应体系 缓冲液 模板 引物 底物dNTP TaqDNA聚合酶 Mg2+ PCR的基本原理 变性 denature 加热至90-96℃,双链模板 氢键变成单链。 退火 annealing 当温度突然降低至45-65℃, 引物与其互补的单链DNA模 板在局部形成杂交链。 延伸 extension　70-74℃下，在Taq DNA 聚合 酶和四种脱氧核糖核苷三磷酸底 物及Mg2+存在的条件下引物沿着模