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细胞学说的建立与发展 生物科学研究的重要工具——显微镜 细胞的大小和形态 细胞学说的建立与发展 细胞的形态和大小 1665年 1838年 1839年 1858年 1665年 1665年,英国科学家胡克用自 己设计与制造的的简易显微镜观察 栎树软木塞切片时,发现其中有许 多小室,他把这些小室称为细胞, 实际上胡克当时看到的是细胞壁。 这是人类发现细胞的第一步。 1838年 1838年,德国植物学家施莱登使 用分辨率达1μm的显微镜,观察了量 的植物组织后提出:“植物,不论发展 到多么高级,都是由充分个体化的、 各自独立的、分离的物体组成的聚合 物,这些物体就是细胞。” 1839年,德国动物学家施旺通过对鱼、蛙、猪、等多种多细胞的系统 观察后提出:“细胞是有机体,整个动 物和植物都是细胞的集合体,它们依照 一定的规律排列在动植物体内。” 1839年 1858年,德国医生和病理学家魏尔肖指出:“细胞只能来自细胞,细胞是一个相对独立的生命活动的基本单 位。这被认为是对细胞学说的重要补 充。” 1858年 生物科学研究的重要工具——显微镜 1、什么是显微镜? 显微镜是由不同功能的透镜和显微镜机械本体所 共同组合而成的一种仪器,它可以使受观察的物体产生一放大的物像,而便于观察,通常用来观察眼睛无法直接看到的微小物体和物体微细构造。 生物科学研究的重要工具——显微镜 2、显微镜的分辨力 分辨力是指显微镜(或人的眼睛距目标25cm处)能分辨物体最小间隔的能力,分辨力的大小决定于光的波长和镜口率以及介质的折射率,用公式表示为: R=0.61λ /N.A. N.A.=nsinα/2 式中:n=介质折射率;α=镜口角(标本对物镜镜口的张角),N.A.=镜口率(numeric aperture)。镜口角总是要小于180?,所以sina/2的最大值必然小于1。 显微镜的发明 发现的各种细胞 雨水中的微生物 列文·虎克 自制的显微镜 (300×) 普通光学显微镜的构造 目镜 粗准焦螺旋 镜筒 细准焦螺旋 转换器 物镜 镜臂 聚光器 反光镜 镜座 光学显微镜的原理 1、在观察细胞样品时,被观察的物像通过物镜到达目镜,物像被两次放大。所以 放大倍数=物镜的放大倍数×目镜的放大倍数 2、由于可见光的波长在380~760nm范围内,因此,最精确的光学显微镜的放大倍数也只有1500倍。 电子显微镜的发明 电子显微镜下的蚊子 最早的电子显微镜 高电压下电子流波长很短 (10 0000 ×) 卢斯卡 (Ernst Ruska) 20C30s 常用的电子显微镜 透射电子显微镜 常用的电子显微镜 扫描电子显微镜 大肠杆菌 其他显微镜 1)荧光显微镜 尼康E800荧光DIC显微镜 荧光显微镜照片(微管呈绿色、微丝红色、核蓝色) 其他显微镜 2)激光共聚焦扫描显微镜 其他显微镜 3)相差显微镜 草履虫相差显微图 肉毒梭菌相差显微图 其他显微镜 4)暗野显微镜 梅毒螺旋体暗视野显微图 团藻和水绵暗视野显微图 原理图 未经染色的标本和活细胞 把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,使各种结构变得清晰可见 相差显微镜 小至 4~200nm的微粒子 聚光镜中央的挡光片使照明光线不直接进人物镜,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜成像 暗视野显微镜 1.观察细胞形态 2.细胞内生化成分的定量分析、光密度统计以及细胞形态的测量 用激光作扫描光源,逐点、逐行、逐面快速扫描成像 ,扫描的激光与荧光收集共用一个物镜,物镜的焦点即扫描激光的聚焦点 激光共聚焦扫描显微镜 细胞中的某些物质 (叶绿素、微管等) 落射式光源通过物镜投射于样品上,经紫外线照射发出荧光 荧光显微镜 样品的表面形态 电子射到样品表面发射出更多的二次电子,放大 扫描电子显微镜 细胞内部的超微结构 电子穿透薄切片,然后经电磁“透镜”放大 透射电子显微镜 生物体的器官组织结构或生物细胞的内部构造 查看 可观察到的范围 原理 光学显微镜 除病毒和少数种类以外,生物体 都是由细胞构成的,细胞的形状和大 小各不相同。 ·细胞的大小 ·细胞的形态 ·边做边学:使用光学显微镜观察各种各样的细胞 细胞的大小 细胞的各种形态
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