基因工程与应用解剖.doc

前言 众所周知，癌症是现今社会死亡率较高的疾病之一，不仅是因为治疗技术有限，更主要的是肿瘤难以被发现导致错过了最佳治疗时期，癌症如果能够早期发现，根治的机会大大增加。但是，目前世界上公认只有乳腺癌、结直肠癌、子宫颈癌、前列腺癌等几种癌症，可能在无症状的情况下，通过常规健康体检及普查能够早期发现。而日常我们看到的癌症，大多数都是因为出现了或多或少的临床症状而就医后被确诊的。事实上，通过健康体检发现的癌症不一定都是癌症早期，而即使接受了昂贵的仪器设备检查，也不能保证能早期发现所有癌症。 荧光蛋白作为新一代生物源性荧光标记物质具有高效、稳定、无毒、易于检测等特性，也已广泛用于各种蛋白质、细胞器的标记和特定基因表达研究。如果将这种荧光蛋白导入含有大量蛋白质的食物中（如大豆、鸡蛋、牛奶等），就可以通过人体对食物的消化、吸收、分布将荧光蛋白带入体内，肿瘤细胞增殖需要大量蛋白质，根据各部位荧光蛋白的含量可以确定各器官的健康状况。此方法不仅减少人们昂贵的仪器检查费用，更减少了人们在检查中所承受的痛苦，提高了肿瘤检测的精确度以及便于早期发现，有利于肿瘤疾病的治疗。 前言 1 一、设计目的 3 1、癌细胞难以被发现 3 2、癌症检查技术有限 3 3、癌症检查费用昂贵 3 二、设计思路 4 三、设计步骤 5 1、目的基因的获取 5 2、基因表达载体的构建 6 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测和表达 7 四、设计流程 8 1、目的基因获取 8 2、目的基因表达载体构建示 8 3、将目的基因导入受体细胞 9 4、重组细胞的筛选及鉴定 9 五、参考文献 11 一、设计目的 1、癌细胞难以被发现 早期肿瘤较小，尤其直径小于1厘米的微小肿瘤，常规体检难以查出，像胰腺癌、卵巢癌、纵隔肿瘤等生长部位隐蔽的肿瘤，也难以通过常规体检早期发现，而某些恶性程度很高的癌症，即使原发病灶很小，可能也已发生了血行播散或淋巴道播散。癌细胞是一种伴随着机体的衰老过程而难以避免的生理偏差，越到老年，细胞复制的次数越多，加上老年人自身的免疫监视、识别、清理系统等的功能弱化，出偏差的概率就越高。 癌症在目前的医学研究水平下，确实是一种比较难治的疾病，难的原因在于，癌症早期没有征兆，80%的病人发现时已经是晚期了手术、放疗、化疗、生物治疗等多种治疗方式最常检查的是AFP和CEAAFP结和B超可以检查原发性肝癌CEA,对原发性结肠癌，胰腺癌、胆管癌、胃癌。食道癌、肺癌、乳腺癌和泌尿系统肿瘤都有早期发现的帮助正常到医院检测的手段如：CT，X线，活检，核磁共振等，最基本的费用是上千块，贵的可能上万 荧光大豆设计基本程序 三、设计步骤 1、目的基因的获取 1、1目的基因选择 红色色荧光蛋白是一种能发光的蛋白质，类似于示踪元素，荧光蛋白质可作为标签蛋白，标识生物体内蛋白质的位置，它照亮了人们以前看不到的世界。 来源 特点 用途 红色色荧光蛋白 （RFP） 深红色海葵 （1）颜色鲜亮、穿透性强、能在生物体稳定存在 （2）从外界就可以明显看到这种深红色荧光蛋白质从动物肌肉组织深处发出的亮光，而同种处于肌肉组织深处的一般荧光蛋白质发出的光则几乎看不见 够在生物体内稳定存在，同时能发出更明亮红光的蛋白质 用于活体物内脏的深度成像，从而有助于研究人员在活生物体身上非侵入式地进行癌细胞发展和治疗过程的实时研究，使我们对癌症等疾病的发病过程有更深入的了解 获取目的基因的方法有从两种，一种是基因文库提取，另一种是人工合成法。人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95DNA解链；第二步：冷却到55～60，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。 基因表达载体的构建使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。组成目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因将目的基因导入受体细胞目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。常用的转化方法将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物