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强冷凝集对血常规检测结果的影响及处理方法探讨
【摘 要】目的:探讨强冷凝集对血常规检测结果的影响及处理方法。方法:对强冷凝集的血常规检测标本分别采用未处理的直接检测法、37℃水浴法、血浆置换法、标本3倍稀释37℃水浴法,利用sysmexXT-4000血细胞分析仪进行检测,并与传统的显微镜手工计数法计数WBC、RBC、PLT 、微量法测定HCT等项目结果进行分析比较。结果:强冷凝集的标本检测时,仪器出现红细胞凝集相关报警。与传统方法比较,PLT、WBC测定受强冷凝集素影响较小;而强冷凝集素对RBC、HCT、MCV、MCH和MCHC的测定造成严重干扰,其中RBC、HCT显著减低,MCV、MCH和MCHC异常增高,Hb与RBC比例明显异常。PLT用直接检测法、37水浴法、3倍稀释37℃水浴法所测结果,RBC、HCT 用血浆置换法、稀释3倍法所测结果以及WBC用上述4种方法所测结果与传统方法比较差异均不大,符合CLIA,88能力验证计划的分析质量要求。但血浆置换法对PLT影响明显;而直接检测法、37℃水浴法对RBC、HCT影响明显。结论:对强冷凝集标本推荐采用3倍稀释37℃水浴法检测,可以有效地消除强冷凝集对血常规检测结果的干扰。
【关键词】冷凝集;血常规;水浴;3倍稀释;微量法
【中图分类号】R 446.11 【文献标识码】A 【文章编号】1004―7484(2013)09―0003―02
血常规是临床应用最广泛的检验项目之一,也是临床医生最先获得患者资料的检验项目,先进的全自动血液分析仪可提供许多有价值的检测结果,其准确性直接影响临床对疾病的诊断和治疗。在日常检验工作中,某些因素可干扰血液分析仪计数而出现异常检测结果,冷凝集是常见的干扰因素之一。现将我科遇到的1例强冷凝集对血常规检测结果的影响进行分析,并对处理方法进行探讨。
1 资料与方法
1.1病例资料 某男,58岁。2013年4月23日因骨折前来我院就诊(经询问其是位免疫性溶血性贫血患者)。其血常规检测结果见表1。
1.2 仪器与试剂 日本Sysmex公司的XT-4000的血液分析仪与配套原装试剂,四川迈克生物科技股份有限公司的质控物,OlympusCX21双目显微镜,移液器(20-200μl),微量吸管,毛细管,EDTA―K2末梢血抗凝管,高速离心机。仪器使用前均已校准,每日测定质控物,结果均在允许范围内。
1.3 分析方法
1.3.1血常规分析方法
将冷凝集标本,采用下述不同方法处理后在SysmexXT-4000上检测。①直接检测;②37℃水浴30min后检测;③160g离心6min,弃上清后加入等量的稀释液充分混匀,反复洗涤3次后上机检测;④采用EDTA―K2末梢血抗凝管,取40μl末梢血加入80μl稀释液中,37℃水浴30min后检测。同时采用手工显微镜方法计数白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT);以及微量法测定红细胞比容(HCT):取末梢血,充入含有肝素抗凝剂的一次性专用毛细管内,封口后,用水平式毛细管离心机125000g离心5min,用专用刻度尺,读取红细胞柱和全柱长度,计算HCT值【1】。
1.3.2 冷凝集素效价测定
抽取患者不抗凝静脉血2ml,37℃水浴凝固后,迅速分离血清。取血清0.5ml用生理盐水倍比稀释后,加等量用生理盐水洗涤后的3人份混合的2%“O”型红细胞悬液混匀,4℃冰箱中静置2-4h后观察结果【1】。
2 结果
2.1 数据结果
强冷凝集的标本检测时,仪器出现红细胞凝集相关报警。由表1检测结果可知,与传统方法比较,PLT、WBC测定受强冷凝集素影响较小;而强冷凝集素对RBC、HCT、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)和红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)的测定造成严重干扰,其中RBC、HCT显著减低,MCV、MCH和MCHC异常增高,Hb与RBC比例明显异常。 PLT用直接检测法、37水浴法、3倍稀释37℃水浴法所测结果,RBC、HCT 用血浆置换法、稀释3倍法所测结果以及WBC用上述4种方法所测结果与传统方法比较差异均不大,符合CLIA,88能力验证计划的分析质量要求【1】。但血浆置换法对PLT影响明显 ;而直接检测法、37℃水浴法对RBC 、HCT影响明显。
2.2 冷凝集效价检测结果
冷凝集效价检测结果为1:2048。
3讨论
冷凝集素是红细胞自身免疫抗体,多数以IgM型,少数为IgG、IgA型或它们的混合型[2]。大多数人血清中都存在冷凝集素,其效价在4℃ 时一般小于1:16,不会导致自身红细胞的凝集。但在某些病理(如自身免疫性溶血性贫血、支原体肺炎等)情况下,冷凝集素效价可异常增
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