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实验十三 植物多倍体诱发和鉴定 一、实验目的 了解人工诱导多倍体的原理,学习用秋水仙碱诱发多倍体植物的方法,学习识别多倍体植物的形态特征及其细胞学特点。 二、实验原理 秋水仙碱是细胞有丝分裂的抑制剂,它的主要作用是抑制纺锤丝微管的形成,因而抑制了染色体移向两极的运动,使细胞停滞在中期状态而不能分裂成二个新的子细胞,而秋水仙碱对染色体结构并无明显的影响,对细胞也不产生严重毒害,细胞解除秋水仙碱环境后仍可正常生长分裂,因而出现细胞含有多个染色体组的情况,亦即构成了多倍体细胞。如果用秋水仙素处理植物的根尖,则在根尖分生区内可检测到大量染色体加倍的细胞,若处理植物幼苗的芽,则可以得到染色体加倍的植株。 三、实验材料 洋葱(Allium cepa,2n=16)、蚕豆(Vicia faba,2n=12)、西瓜(Citrullus vulgaris ,2n=22)等作物的种子、根尖、花蕾或幼苗 。 四、实验用具药品 1.用具:显微镜、烧杯、培养皿、载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、刀片、解剖针、纱布、吸水纸等。 2.药品试剂:秋水仙碱、改良品红染色液、无水酒精、冰醋酸、1N盐酸。 五、实验步骤 1.多倍体的诱发 可处理萌动种子,幼苗或植株生长点,浓度以0.01~0.4%为宜;在以实验室观察为目的的情况下,可以处理根尖。 2.植株形态特征的观察 整个植株、或组织、器官、细胞都可以看到增大,其中气孔,保卫细胞表现尤为明显。 3.细胞学观察 用根尖压片法制成染色体玻片标本,在显微镜下认真观察和染色体计数,与对照进行对比。 洋葱根尖细胞染色体(染色体加倍) 洋葱根尖细胞染色体(正常二倍体细胞) 六、作业及思考题 1.与对照植物相比,处理后的多倍体植物有哪些不同特征? 2.你观察到的被鉴定物种的染色体数目是多少?处理后得到了哪些染色体数目变异类型的细胞? 3.许多染色体畸变的类型可以通过多倍体传递下去,且多倍体植物对环境具有更强的适应性,为什么? 4.使用秋水仙诱导多倍体时应注意哪些问题? * *
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