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- 2016-12-24 发布于湖南
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菠萝蛋白酶的提取纯化及化学修饰对其活性的影响
实验研究内容:
菠萝蛋白酶活力测定方法的确定;
菠萝蛋白酶的稳定性研究;
菠萝蛋白酶的纯化;
菠萝蛋白酶的修饰;
修饰酶与修饰酶的活力比较。
参考文献:
《提取菠萝酶工艺的研究》——胡莉娟,杨凌职业技术学院药物工程系
《菠萝蛋白酶的提取及其在医药中的应用》——李淑喜,黎新明
《不同金属离子对菠萝蛋白酶活性及热稳定性的影响》——曾霖霖,黄惠华
《聚乙二醇对菠萝蛋白酶的化学修饰》——吉林大学生命科学学院
1、菠萝蛋白酶的提取纯化:
单宁沉淀法:
原理:
菠萝蛋白酶是典型的巯基蛋白质, 广泛存在于菠萝果实、芽、叶、茎中, 分子量为33 000, 能分解蛋白质和酰胺等。它的水解活性较木瓜酶高10 倍以上。因此有广泛的用途。它作为一种食品添加剂可用于肉质嫩化、啤酒澄清. 还用于胶、水解蛋白的生产, 在医药上它可在生物体内溶解纤维蛋白及血凝块。因此可以治疗水肿及多种炎症, 它能迅速溶痂。对正常组织无害, 不影响植皮, 适用于中小面积深度烧伤的治疗。
1.1技术路线:
鲜果皮汁(加5%苯甲酸钠液,混匀10min)
↓
混合液(离心4000rmp,7min)
↓
上清液(加入单宁液,边加边搅15min)
↓
酶糊复合物(离心4000rmp,5min)
↓
沉淀物
1.2操作要点:
(1)菠萝蛋白酶的提取
称取1 kg制备好的鲜果皮
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