专题1 基因工程研究.ppt

此转基因实验实现了哪种生物的哪些性状在另外哪种生物中表达？ 性状的表达与我们从前学过的什么过程有关？ DNA重组技术的基本工具 准确切割DNA的工具（“分子手术刀”） ——限制酶 DNA片段的连接工具（“分子缝合针”） ——DNA连接酶 基因转移工具（“分子运输车”） ——基因进入受体细胞的载体 在自然界中有一些生物的DNA可能进入另一种生物的细胞中。我们有没有学过相关的实例？ 现今存在的生物为什么没有在长期的进化过程中被外源DNA的入侵而灭绝，仍能保持一种稳定状态？ 从哪里可以找到这种切割外来的DNA而对自身不切割的物质？ 这种酶具有什么作用？ 限制酶所识别的序列有什么特点？ 中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。 图1-1 限制酶识别序列的中心轴线 质粒是细胞染色体外能自我复制的小型闭合环状DNA分子； 质粒存在于许多细菌及酵母菌等微生物中； 质粒的存在对宿主细胞生存没有决定性的作用； 质粒的复制只能在细胞内完成。 质粒是真核细胞细胞核外或原核生物拟核区外能够进行自主复制的遗传单位。 包括真核生物的细胞器（主要指线粒体和叶绿体）中和细菌细胞拟核区以外的环状脱氧核糖核酸(DNA)分子。 现在习惯上用来专指细菌(大肠杆菌）、酵母菌和放线菌等生物中细胞核或拟核中的DNA以外的DNA分子。 在基因工程中质粒常被用做基因的载体。 线粒体中应该没有质粒,而是凸出的嵴,能够增大内膜面积,为有氧呼吸有关酶提供足够的空间； 叶绿体中的质粒里有许多光合作用有关的色素,对光合作用十分重要。 小结： 基因工程最基本的工具有： 补：原核细胞的基因结构 限制酶在原核生物中的作用 原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，但是，生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，以防止外来病原物的侵害。限制酶就是细菌的一种防御性工具，当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割掉，以保证自身的安全。所以，限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效，从而达到保护自身的目的。 含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。 基因工程的基本操作程序 如何从基因库获得目的基因？ 根据目的基因的有关信息例如： 1.根据基因的核苷酸序列 2.基因的功能 3.基因在染色体上的位置 4.基因的转录产物mRNA 5.基因的表达产物蛋白质 基因工程载体的构建需要考虑哪些方面的因素？ 主要考虑几方面的因素。 （1）基因的特点： 如果一个来自动物的目的基因含有内含子，就不能用于转基因植物，因为动物中内含子的剪接系统与植物的不同，植物不能将动物基因的内含子剪切掉，只能用该基因的cDNA。 基因的产物如果是一个糖蛋白，那么该基因在原核生物细菌中表达出来的蛋白就可能不具备天然状态下的活性，因为糖蛋白上的糖链是在内质网和高尔基体上加上的，而细菌无这些细胞器。 （2）要选择强启动子或组织特异性启动子。启动子有强有弱，选择强启动子可以增加转录活性，使基因产物量增多。如果希望基因在生物的某个组织表达，如只在植物种子中表达，就要选择种子中特异表达的启动子。 （3）要有选择标记基因，如抗生素基因，以便选择出真正的转基因生物。 限制性核酸内切酶 主要是从 的一种酶。 识别双链DNA 分子的某种 ，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 断开。 形成两种末端 基因进入受体细胞的载体 通常有三种: 在进行基因工程操作中,真正被用作载体的质粒都是在 基础上进行过 的 基因工程的基本操作程序 转黄瓜抗青枯病基因的马铃薯 膀胱反应器有着和乳腺反应器一样的优点： 收集产物蛋白比较容易，不必对动物造成伤害。 此外，该系统可从动物一出生就收集产物，不论动物的性别和是否正处于生殖期。 膀胱生物反应器最显著的优势在于从尿中提取蛋白质比在乳汁中提取简便、高效。 常见的基因工程药物种类（P22） 1.基因工程药物的化学本质？ 2.干扰素的概念？ 3.产生干扰素的细胞？ 4.如果使用大肠杆菌作为受体细胞，生产出来的干扰素有活性吗？ 体外基因治疗和体内基因治疗？ 二、蛋白质工程的基本原理 蛋白质工程的内容主要有两方面： 蛋白质工程是应怎样的需求而崛起的？ 蛋白质工程的崛起主要是工业