福建省莆田八中高二生物《第6章 从杂交育种到基因工程》教.doc

福建省莆田八中高二生物《第6章 从杂交育种到基因工程》教案 1、诱变育种 （1）原理：基因突变 （2）方法：用物理因素（如X射线、γ射线、紫外线、中子、激光、电离辐射等）或化学因素（如亚硝酸、碱基类似物、硫酸二乙脂、秋水仙素等各种化学药剂）或空间诱变育种（用宇宙强辐射、微重力等条件）来处理生物。 （3）发生时期：有丝分裂间期或减数分裂第一次分裂间期 （4）优点：能提高变异频率，加速育种进程，可大幅度改良某些性状，创造人类需要的变异类型，从中选择培育出优良的生物品种；变异范围广。 （5）缺点：有利变异少，须大量处理材料；诱变的方向和性质不能控制，具有盲目性。 （6）举例：青霉素高产菌株、太空椒、高产小麦、“彩色小麦”等 2、杂交育种 （1）原理：基因重组 （2）方法：连续自交，不断选种。（不同个体间杂交产生后代，然后连续自交，筛选所需纯合子） （3）发生时期：有性生殖的减数分裂第一次分裂后期或四分体时期 （4）优点：使同种生物的不同优良性状集中于同一个个体，具有预见性。 （5）缺点：育种年限长，需连续自交才能选育出需要的优良性状。 （6）举例：矮茎抗锈病小麦等 3、多倍体育种 （1）原理：染色体变异 （2）方法：秋水仙素处理萌发的种子或幼苗。 （3）优点：可培育出自然界中没有的新品种，且培育出的植物器官大，产量高，营养丰富。 （4）缺点：结实率低，发育延迟。 （5）举例：三倍体无子西瓜、八倍体小黑麦 4、单倍体育种 （1）原理：染色体变异 （2）方法：花药离体培养获得单倍体植株，再人工诱导染色体数目加倍。 （3）优点：自交后代不发生性状分离，能明显缩短育种年限，加速育种进程。 （4）缺点：技术相当复杂，需与杂交育种结合，其中的花药离体培养过程需要组织培养技术手段的支持，多限于植物。 （5）举例：“京花一号”小麦 5、基因工程育种（转基因育种） （1）原理：基因重组 （2）方法：基因操作（提取目的基因→装入载体→导入受体细胞→基因表达→筛选出符合要求的新品种） （3）优点：目的性强，可以按照人们的意愿定向改造生物；育种周期短 。 （4）缺点：可能会引起生态危机，技术难度大。 （5）举例：抗虫棉、转基因动物（转基因鲤鱼）等 一、DNA重组技术的基本工具 ①、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 （1）来源：原核生物 （2）作用（特异性）——限制性核酸内切酶能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并在使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 （3）限制性内切酶的切割方式：①在中心轴线两侧将DNA切开，切口是黏性末端。②沿着中心轴线切开DNA，切口是平末端。 ②.DNA连接酶——“分子缝合针” （1）DNA连接酶的分类：E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。 （2）作用及作用部位：E.coliDNA连接酶作用于黏性末端被切开的磷酸二酯键，T4DNA连接酶作用于黏性末端和平末端被切开的磷酸二酯键。 ③.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” （1）常用的运载体：①质粒：常存在于原核细胞和酵母菌中，是一种分子质量较小的环状的裸露的DNA分子，独立于拟核之外。②病毒：常用的病毒有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 （2）运载体使用的目的：①是用它做运载工具，将目的基因转运到宿主细胞中去。②是利用它在受体细胞内对目的基因进行大量复制。 （3）作为运载体必须具备的条件：①在宿主细胞中保存下来并大量复制 ②有多个限制性内切酶切点 ③有一定的标志基因，便于筛选 ④对受体细胞无害，不会影响受体细胞正常的生命活动。 二、基因工程的基本操作程序 1．目的基因的获取： A、目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因，目前被广泛提取使用的目的基因有：苏云金杆菌抗虫基因、植物抗病基因（抗病毒、抗细菌)、人胰岛素基因等。 B、获得目的基因的方法 （1）从基因文库中获取目的基因： 基本概念：基因文库、基因组文库、部分基因文库（cDNA文库） 怎样提取：根据目的基因有关信息，例如，根据基因的核苷酸序列，基因的功能，基因在染色体的位置，基因的转录产物mRNA以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基因。 ⑵利用PCR技术扩增目的基因： 原理：DNA双链复制 前提：一段已知目的基因的核苷酸序列，根据这一序列合成引物。 条件：a..四种脱氧核苷酸 b.DNA的两条链为模板 c.热稳定DNA聚合酶(Taq酶） d.一对引物（一小段单链DNA或RNA，一般20～30个碱基，能与DNA母链的一段碱基序列互补配对） e.温度控制和缓冲液 PCR技术扩增过程: a、DNA变性（90℃-95 b、复性（55℃-60 c、延伸（70℃-75℃）：在Taq酶的作用下，从 引物的5′端→3 ⑶人工合成: ①反转录法： 以目的基因转录成的信使RNA为模板，