蛭弧菌的综述.docVIP

蛭弧菌的综述 １　引言 蛭孤菌(Bdellovibrio)是寄生于某些细菌并能导致其裂解的一类细菌，为细菌的寄生菌，其在自然界分布很广，从自然水域、污水及土壤中均可分离到。由于其能裂解多种细菌以及特殊的生活方式而使之具有生态学优势，故被认为是自然净化的生物因子之一[1]。 根据GC比例，过氧化物酶、蛋白酶活性，耐药性和寄生性将蛭弧菌分为三种。它们分别是：噬菌蛭弧菌、斯托普蛭弧菌、斯塔尔蛭弧菌。噬菌蛭弧菌的GC比例较高，约为50.4 ± 0.9 mol %。过氧化酶呈阳性，对弧菌抑制剂0/129敏感，蛋白酶的活性相对较低，依赖于宿主繁殖。它在特殊条件下可转化为兼性腐生菌[2]；斯托普蛭弧菌的GC比例（42-43 mol %），过氧化酶呈阴性，对弧菌抑制剂0/129呈抗药性，蛋白酶活性相对较高，宿主仅限于假单胞菌；斯塔尔蛭弧菌的GC比例较低（42-43 mol %），过氧化酶呈阳性，对弧菌抑菌剂0/129敏感，蛋白酶活性较高，可兼性寄生性，或可依赖宿主菌而生活[3]。 蛭弧菌的特性为：绝大部分菌株接种营养琼脂不形成茵落，在含有宿主菌的自来水琼脂平板上形成无菌落生长的透明噬斑，最适温度为25-37℃，可使含有浓厚的宿主菌的自采水悬液数日内裂解澄清。其形态为弧形或杆状，大小为1.0-7.5×025-0.8 μm，端生一根长靴毛，有的靴毛包被鞘膜。其宿主范围较广，可裂解多种革兰氏阴性菌，如I鸡白痢沙门氏茵、猪霍乱沙门氏菌， 羔羊大肠肝菌、 弗氏志贺氏菌、宋内氏志贺氏菌、鲍氏志贺氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌以及变形杆菌等，但均不裂解猪丹毒杆菌、猪巴氏杆菌及枯草轩菌。 蛭弧菌在1962年由Stolp和Petzold首次发现的。近二十年来，国外对它进行了许多研究工作，在我国．1982年司稚东等首次报导了对噬菌蛭弧菌的研究[4]。我国分别对蛭弧菌在等方面进行了研究。 　　多年来许多学者致力于蛭弧菌的研究。但由于蛭弧菌的种类有30多种之多，而其在噬菌方面又具有许多特点，为便于以后有关人员的研究工作,现将国内外相关研究做一综述。 关于蛭弧菌的分类问题，我们在“蛭弧菌研究”一文中作了简述，阐明在伯杰氏(Bergey,s)细菌鉴定手册第九版中，将蛭弧菌列入薄壁菌门蛭弧菌属，属下分为4 个种，即噬菌蛭弧菌(Bdellovibrio bacteriovorus)、斯托普蛭弧菌(Bd.stolpii)、斯塔尔蛭弧菌(Bd.starrii)和未命名的种(海水菌株)。但在国内外一些报道的文章中，多将所分离和试验研究的蛭弧菌归属于噬菌蛭弧菌，特别是国内近年的一些报道，仍然如此。根据他们在文中对其生物学特性等描述，只能说是蛭弧菌。若要表明所分离或试验研究的菌株属于何种蛭弧菌，需根据伯杰氏细菌鉴定手册第九版所要求的，对其生物学特性，包括寄生性、蛋白酶活性和DNA的G+C克分子百分比等进行检测来予以确定。 　　关于蛭弧菌的寄生性问题，在伯杰氏第九版，有关蛭弧菌分类一段中指出，噬菌蛭弧菌为专性寄生菌，而斯托普蛭弧菌等为兼性寄生。然而，秦生巨等报道，用高温(100 ℃,加热)杀死大肠杆菌等宿主菌，在制备的双层琼脂平板上，噬菌蛭弧菌仍能形成噬菌斑，并且形成的噬菌斑数增加百倍以上。形成噬菌斑的时间也快；他们还指出，在加热致死的宿主菌上生长增殖的噬菌蛭弧菌再接种到活的宿主菌琼脂平板上，仍能恢复其生长特性和裂解的活力。这一试验表明，噬菌蛭弧菌能在死的宿主菌上生长繁殖，那么它就不是专性寄生菌，亦或像秦生巨等所试验的菌株不是噬菌蛭弧菌，而是其他的蛭弧菌。关于蛭弧菌在加热杀死宿主菌琼脂平板上形成噬菌斑的问题，我们对3株蛭弧菌进行了试验。用加热灭活的大肠杆菌(E.coli C60)和活菌E.coli C600，以双层平板法所做试验表明，两者产生的噬菌斑数亦相差100倍以上。试验还表明，在灭活E.coli双层琼脂平皿上噬菌斑形成的时间较快(2448 h)，但消失也快(1个星期左右)，而在活的E．coli双层琼脂平皿上，噬菌斑形成慢(4896 h)，所形成斑一般不消失，并且会融合成片。与此同时，我们还发现所试验蛭弧菌菌株，在加热致死的宿主菌上继代以后，再接种在活的宿主菌琼脂平皿上，不能恢复其产生噬菌斑的裂解活力。这一特性各个菌株有所差异，有的在连续移植3代以后便失去了对活宿主菌的裂解活力，有的到1代以后。而秦生巨等试验所表述的仍能恢复活力，没有表明移植的代数。这一试验表明，我们所试验研究的蛭弧菌是兼性寄生菌，其分类地位有待进一步确定。 　　关于蛭弧菌的宿主菌范围，据国内外研究报道，蛭弧菌与噬菌体不同，其宿主菌范围比较广。噬菌体对宿主菌的裂解有其专一性，不仅对同一属菌有差异，就是同一种菌的不同菌株亦有差异，如沙门氏菌噬菌体，对不同血清型的沙门氏菌的敏感性亦有差异，因此医学上用沙门氏菌